一种超声波提取沙棘活性多肽的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN108277248A(43)申请公布日2018.07.13(21)申请号201711482002.9(22)申请日2017.12.29(71)申请人磐安县派普特生物科技有限公司地址322399浙江省金华市磐安县安文镇龙山路10号3501室(72)发明人陈雨诗(74)专利代理机构北京华识知识产权代理有限公司11530代理人赵永强(51)Int.Cl.C12P21/06(2006.01)C07K1/36(2006.01)C07K1/34(2006.01)C07K1/16(2006.01)权利要求书1页说明书5页(54)发明名称一种超声波提取沙棘活性多肽的方法(57)摘要本发明公开了一种超声波提取沙棘活性多肽的方法，具体制备步骤为：将沙棘籽中加入吡喃葡萄糖和吡喃半乳糖，初粉碎后超微粉碎得沙棘超微粉；向沙棘超微粉中加入蒸馏水、纤维素酶、植酸酶与单宁酶，水解，灭酶，离心，留取沉淀物质，干燥；向沙棘粉中加入蒸馏水、碱性蛋白酶、中性蛋白酶和左旋维生素C，超声波辅助提取，灭酶，冷却后的酶解液超滤得沙棘活性多肽粗液；将沙棘活性多肽粗液加入到色谱柱中，用双蒸水洗脱，洗脱液加入到大孔树脂柱，依次用双蒸水和乙醇溶液洗脱，洗脱液干燥得沙棘活性多肽。有益效果为：本发明提取方法简单可行，预处理时间短，沙棘活性蛋白纯度高、提取率高，得到的沙棘活性多肽具有抗菌性和保水性。CN108277248ACN108277248A权利要求书1/1页1.一种超声波提取沙棘活性多肽的方法，包括沙棘超微粉制备、沙棘超微粉预处理、超声波辅助提取、分离纯化，其特征在于：所述沙棘超微粉制备步骤为：将将沙棘籽中加入吡喃葡萄糖和吡喃半乳糖，混合均匀，初粉碎后超微粉碎，即得沙棘超微粉，备用。2.根据权利要求1所述的一种超声波提取沙棘活性多肽的方法，其特征在于：所述吡喃葡萄糖和吡喃半乳糖的添加量分别为沙棘籽重量的0.2-0.24‰和0.1-0.15‰。3.根据权利要求1所述的一种超声波提取沙棘活性多肽的方法，其特征在于：所述沙棘超微粉预处理步骤为：按料液比为1:5-10（g/mL）向沙棘超微粉中加入蒸馏水，混合均匀，调节pH至4-5，然后加入纤维素酶、植酸酶与单宁酶，水解1-2h，灭酶，离心，留取沉淀物质，干燥，备用。4.根据权利要求3所述的一种超声波提取沙棘活性多肽的方法，其特征在于：所述加酶量为0.8-1.2%，所述纤维素酶、植酸酶与单宁酶的重量比为2:0.8-1.0:1.1-1.3。5.根据权利要求1所述的一种超声波提取沙棘活性多肽的方法，其特征在于：所述超声波辅助提取步骤为：按料液比为1:12-17（g/mL）向沙棘超微粉预处理得到的沙棘粉中加入蒸馏水，混合均匀，调节pH至7.5-8.5，然后加入碱性蛋白酶和中性蛋白酶，再加入左旋维生素C，随后在50-60℃、超声波功率为120-150W的条件下超声波辅助提取1.5-2.5h，灭酶，冷却后的酶解液过截留分子量为2-3kDa的超滤膜，收集小于2-3kDa组分，即为沙棘活性多肽粗液。6.根据权利要求5所述的一种超声波提取沙棘活性多肽的方法，其特征在于：所述碱性蛋白酶和中性蛋白酶的加酶量为1.2-1.4%和0.5-1.2%。7.根据权利要求5所述的一种超声波提取沙棘活性多肽的方法，其特征在于：所述左旋维生素C的添加量为碱性蛋白酶重量3-5%。8.根据权利要求1所述的一种超声波提取沙棘活性多肽的方法，其特征在于：所述分离纯化步骤为：按照活性炭色谱柱体积的1:15-20将沙棘活性多肽粗液加入到色谱柱中，用双蒸水洗脱2-3个体积后，收集洗脱液，洗脱液按照大孔树脂柱体积的1:15-20加入到大孔树脂柱，用双蒸水洗脱1-2个体积后，然后用70-80%乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，经喷雾干燥得沙棘活性多肽。2CN108277248A说明书1/5页一种超声波提取沙棘活性多肽的方法技术领域[0001]本发明涉及多糖技术领域，尤其是涉及一种超声波提取沙棘活性多肽的方法。背景技术[0002]沙棘（SeaBuckthorn）又名醋柳，胡颓子科沙棘属，是一种落叶性灌木。国内分布于华北、西北、西南等地。沙棘为药食同源植物。沙棘的根、茎、叶、花、果，特别是沙棘果实含有丰富的营养物质和生物活性物质，可以广泛应用于食品、医药、轻工、航天、农牧鱼业等国民经济的许多领域。沙棘果实入药具有止咳化痰、健胃消食、活血散瘀之功效。现代医学研究，沙棘可降低胆固醇，缓解心绞痛发作，还有防治冠状动脉粥样硬化性心脏病的作用。沙棘籽渣为沙棘油加工生产后的废弃物，通常只有少量用作饲料，大部分都是作为垃圾废弃掉。而经过提取沙棘油的沙棘籽渣中的蛋白含量达27-30％，蛋白资源被浪费掉。但是由于沙棘籽中含有有较多的植酸和单宁