一种从秋葵中提取纯化多糖的方法及单糖组分鉴定方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN108484785A(43)申请公布日2018.09.04(21)申请号201810084851.7(22)申请日2018.01.29(71)申请人浙江海洋大学地址316022浙江省舟山市定海区临城街道长峙岛海大南路1号(72)发明人孙坤来(74)专利代理机构杭州九洲专利事务所有限公司33101代理人翁霁明(51)Int.Cl.C08B37/00(2006.01)权利要求书1页说明书3页(54)发明名称一种从秋葵中提取纯化多糖的方法及单糖组分鉴定方法(57)摘要一种从秋葵中提取纯化多糖的方法及单糖组分鉴定方法，包括以下步骤：(a)取新鲜秋葵嫩果，使用匀浆机或胶体磨将粉碎的秋葵顶制作成匀浆状；(b)采用过滤的方法将秋葵匀浆进行过滤，分别收集滤饼和滤液，(c)在滤液中加入0.1～2.0％秋葵重量的蛋白酶，加入原料重量0.05％-1％的氯化钙，调节pH为8-9，在30～50℃范围内搅拌6～10h；(d)将酶解液调节pH至3.0～5.5并加入硫酸盐溶液，搅拌均匀，静置后使用离心法将滤液进行处理，收集滤液；(e)将获得的滤液进行超滤处理，收集截留液，喷雾干燥，获得秋葵多糖粉末；它具有提取多糖和鉴定单糖的工艺简单，能提高秋葵多糖的提取率等特点。CN108484785ACN108484785A权利要求书1/1页1.一种从秋葵中提取纯化多糖的方法，其特征在于该方法包括以下步骤：(a)预处理：取新鲜秋葵嫩果，过筛去除秋葵表面的附着物，将秋葵切成丁状，过滤法去除秋葵籽，向粉碎后的秋葵中加入4～8倍重量的水，使用匀浆机或胶体磨将粉碎的秋葵顶制作成匀浆状；(b)提取：采用过滤的方法将秋葵匀浆进行过滤，分别收集滤饼和滤液，(c)酶解：在滤液中加入0.1～2.0％秋葵重量的蛋白酶，加入原料重量0.05％-1％的氯化钙，调节pH为8-9，在30～50℃范围内搅拌6～10h；(d)沉淀处理：将酶解液调节pH至3.0～5.5并加入硫酸盐溶液，搅拌均匀，静置后使用离心法将滤液进行处理，收集滤液；(e)干燥：将获得的滤液进行超滤处理，收集截留液，喷雾干燥，获得秋葵多糖粉末。2.根据权利要求1所述的从秋葵中提取纯化多糖的方法，其特征在于：所述的步骤(c)中，酶解的原料，即滤液是经过一次和二次提取后滤液的合并物；其中二次提取是将前次获得的秋葵滤饼重新悬浮在3～5倍重量的水中，调节溶液pH至3.0-6.0，过滤后收集滤液，为二次提取滤液；所述的蛋白酶是木瓜蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶或胰蛋白酶或这些酶的混合物。3.一种如权利要求1或2所述从秋葵中提取纯化多糖中的单糖组分鉴定方法，其特征在于所述的鉴定方法包括：称取多糖粗品10mg，用3ml浓度为1mol/L硫酸100℃水解4—8h，用饱和Ba(OH)2中和至中性，抽滤后取滤液，经浓缩后点样，薄层层析法分析，采用硅胶G板105℃活化1—3h，通过洗脱峰获得单糖组成如下：2CN108484785A说明书1/3页一种从秋葵中提取纯化多糖的方法及单糖组分鉴定方法技术领域[0001]本发明涉及的是一种从秋葵中提取纯化多糖的方法及单糖组分鉴定方法，属于生物提取及单糖组分鉴定技术领域。背景技术[0002]秋葵为锦葵科(Malvaceae)秋葵属一年生草本植物，黄秋葵原产非洲埃及等地，目前在欧洲和非洲均有大面积种植。作为菜、药、花兼用型植物，其用途颇为广泛，近年来，黄秋葵主要以采摘嫩荚作为菜蔬进行栽培，同时也可用以制备固体饮料、代用茶和多糖产品等。黄秋葵的功能特性主要表现在其具有较高的营养价值和显著的保健和食疗效果两个方面。从营养方面看，黄秋葵富含蛋白质、脂肪、碳水化合物、维生素、矿物质和膳食纤维。黄秋葵富含黄酮、多糖等成分，同时维生素和矿物质的含量也很丰具有保健功能，不仅对心脏、肠胃、皮肤具有保健作用，还有抗疲劳等功效作用。[0003]黄秋葵的嫩荚果含有的粘液状物质，是由多聚半乳糖、半乳聚糖和阿拉伯聚糖与果胶的混合物，其中果胶是一种可溶性纤维，在现代保健新观念中极受重视，它能促进体内有机物质的排泄，可有效减少毒素在体内的积累，降低血糖和胆固醇的含量；同时，秋葵多糖的降解物有利于肠道内益生菌的生长和繁殖，利于肠道健康。[0004]研究报道在动物实验中秋葵黏液可降低小鼠的血浆胆固醇，但机理不明；许多研究结果表明秋葵等多种新鲜蔬菜体外结合胆酸的能力，指出与其他蔬菜，如甜菜、芦笋、青豆等相比，秋葵具有较强的结合胆酸能力，蒸煮对黄秋葵的胆酸结合能力影响不大；近年来大量研究表明多糖的活性研究表明其具有显著的结合胆酸、降低胆固醇的作用。同时，秋葵多糖还可以作为生物材料、医料器械材料等。尽管文献报道了一些秋葵多糖的提取方法，但成本太高，不适合大规模推广。发明内容[0005]本发明