一种菠萝蛋白酶的高效提取方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN108504646A(43)申请公布日2018.09.07(21)申请号201810577249.7(22)申请日2018.06.07(71)申请人贵州沣稷生物科技有限公司地址551600贵州省六盘水市毕节市大方县经济开发区食品药品产业园区54号楼(72)发明人杨沣杨公正杨洲(51)Int.Cl.C12N9/50(2006.01)权利要求书1页说明书5页(54)发明名称一种菠萝蛋白酶的高效提取方法(57)摘要本发明提供一种菠萝蛋白酶的高效提取方法，包括如下步骤：S1菠萝汁的获取；S2上清液的获取：向所述菠萝汁中加入茶多酚和乙二胺四乙酸二钠，混匀后再加入茶皂素和壳寡糖，先快速搅拌再慢速搅拌，然后离心收集上清液；S3上清液的超滤：对所述上清液进行超滤浓缩，得到超滤浓缩液；S4超滤浓缩液的真空冷冻干燥。本发明属于酶提取技术领域，本发明提供的高效提取方法在超滤前有效去除了菠萝蛋白酶以外的杂蛋白和大颗粒物质，减少了后续超滤的堵塞和污染发生，提高了超滤效率，超滤的酶活截留率高达90％以上，得到的菠萝蛋白酶中的杂蛋白含量较少，纯度较高。CN108504646ACN108504646A权利要求书1/1页1.一种菠萝蛋白酶的高效提取方法，其特征在于：包括如下步骤：S1菠萝汁的获取：收集菠萝原料，预冷冻后，经破碎或捣碎后压榨，收集菠萝汁；S2上清液的获取：向所述菠萝汁中加入茶多酚和乙二胺四乙酸二钠，混匀后再加入茶皂素和壳寡糖，先快速搅拌再慢速搅拌，然后于2～10℃、3000～5000rpm条件下离心5～10min，收集上清液；茶多酚的加入量为菠萝汁重量的0.01～0.05％，乙二胺四乙酸二钠的加入量为菠萝汁重量的0.01～0.1％，茶皂素的加入量为菠萝汁重量的0.01～0.1％，壳寡糖的加入量为菠萝汁重量的0.05～0.2％；S3上清液的超滤：对所述上清液先采用截留分子量为50KD的超滤膜进行超滤浓缩，然后再采用截留分子量为20KD的超滤膜进行超滤浓缩至所述上清液体积的18～25％，超滤温度为2～10℃，超滤压力为0.02～0.15MPa，得到超滤浓缩液；S4超滤浓缩液的真空冷冻干燥：将所述超滤浓缩液进行真空冷冻干燥，得到菠萝蛋白酶。2.根据权利要求1所述的菠萝蛋白酶的高效提取方法，其特征在于：所述快速搅拌的转速为300～600r/min，快速搅拌的时间为5～10min；所述慢速搅拌的转速为50～200r/min，快速搅拌的时间为5～20min。3.根据权利要求2所述的菠萝蛋白酶的高效提取方法，其特征在于：所述步骤S2中，快速搅拌的转速为500r/min，快速搅拌的时间为8min；所述慢速搅拌的转速为100r/min，慢速搅拌的时间为10min。4.根据权利要求1所述的菠萝蛋白酶的高效提取方法，其特征在于：所述步骤S2中，茶多酚的加入量为菠萝汁重量的0.01～0.03％，乙二胺四乙酸二钠的加入量为菠萝汁重量的0.02～0.08％，茶皂素的加入量为菠萝汁重量的0.02～0.08％，壳寡糖的加入量为菠萝汁重量的0.1～0.18％。5.根据权利要求3或4所述的菠萝蛋白酶的高效提取方法，其特征在于：所述步骤S2中，茶多酚的加入量为菠萝汁重量的0.02％，乙二胺四乙酸二钠的加入量为菠萝汁重量的0.05％，茶皂素的加入量为菠萝汁重量的0.05％，壳寡糖的加入量为菠萝汁重量的0.15％。6.根据权利要求1所述的菠萝蛋白酶的高效提取方法，其特征在于：所述步骤S3中，超滤温度为4～6℃，超滤压力为0.05～0.1MPa。7.根据权利要求1所述的菠萝蛋白酶的高效提取方法，其特征在于：所述菠萝原料选自菠萝皮和/或菠萝茎。8.根据权利要求1所述的菠萝蛋白酶的高效提取方法，其特征在于：所述步骤S1中，破碎或捣碎的过程中加入木质素酶，木质素酶的加入量为菠萝原料重量的0.002％～0.01％。9.根据权利要求1所述的菠萝蛋白酶的高效提取方法，其特征在于：所述步骤S1中，预冷冻的温度为-10～10℃，预冷冻的时间为5～24h。10.一种菠萝蛋白酶，其特征在于：采用权利要求1至9中任一项所述的菠萝蛋白酶的高效提取方法制得。2CN108504646A说明书1/5页一种菠萝蛋白酶的高效提取方法技术领域[0001]本发明属于酶提取技术领域，尤其涉及一种菠萝蛋白酶的高效提取方法。背景技术[0002]菠萝蛋白酶能分解蛋白质、肽、酯和酰胺等，可用于肉质嫩化、啤酒澄清和干酪生产等。此外，菠萝蛋白酶具有消炎、免疫刺激和抗水肿等作用，可用于炎症、水肿、支气管炎和急性肺炎等的治疗。菠萝蛋白酶已在食品、化妆品和医药等领域得到广泛的应用。[0003]菠萝蛋白酶广泛存在于菠萝的果实、叶、茎和皮等部位中，根据提取部位的不同，菠萝蛋