五妙水仙膏指纹图谱的检测方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109490438A(43)申请公布日2019.03.19(21)申请号201811345926.9(22)申请日2018.11.13(71)申请人南京海昌中药集团有限公司地址210061江苏省南京市高新开发区软件园2号研发楼B座1-3层申请人南京海源中药饮片有限公司(72)发明人蔡宝昌陈海超金俊杰李国维郑艳萍张金龙张卉(74)专利代理机构南京经纬专利商标代理有限公司32200代理人杨海军(51)Int.Cl.G01N30/02(2006.01)G01N30/06(2006.01)权利要求书2页说明书8页附图1页(54)发明名称五妙水仙膏指纹图谱的检测方法(57)摘要本发明公开了一种五妙水仙膏指纹图谱的检测方法，该方法包括以下步骤：步骤1、五妙水仙膏供试品溶液的制备；步骤2、对照品溶液的制备；步骤3、分别精密吸取定量供试品与对照品溶液注入液相色谱图仪，记录色谱图；步骤4、将步骤3中获得的五妙水仙膏指纹图谱仪器导出，并导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统，选择不同批次五妙水仙膏的色谱图中均存在的色谱峰作为共有峰，用平均值计算法生成五妙水仙膏的对照指纹图谱，计算各共有峰的相对保留时间、相对峰面积。本发明所研究的五妙水仙膏指纹图谱检测方法具有方法简单、图谱清晰、重复性高、精密度高等优点。能全面、客观地表现五妙水仙膏的质量。CN109490438ACN109490438A权利要求书1/2页1.一种五妙水仙膏指纹图谱的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、五妙水仙膏供试品溶液的制备：取不同批次的五妙水仙膏样品，精密称取膏体，置锥形瓶中，加含盐酸的甲醇溶液，超声处理后抽滤得到滤液，得到的滤渣再次加含盐酸甲醇溶液重复提取，收集两次得到的滤液，水浴蒸干后，加适量含盐酸甲醇溶解定容，过0.45μm微孔滤膜，得供试品溶液；步骤2、对照品溶液的制备：精密称定盐酸小檗碱对照品，置于容量瓶中，用含盐酸甲醇定容至刻度，摇匀，制成对照品溶液；步骤3、分别精密吸取步骤1的供试品溶液和步骤2的对照品溶液，注入高效液相色谱仪，记录色谱图；步骤4、将步骤3中获得的五妙水仙膏供试品溶液的指纹图谱导出，并导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A；选择不同批次五妙水仙膏的色谱图中均存在的色谱峰作为共有峰；用平均值计算法生成五妙水仙膏的对照指纹图谱，计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积；并根据对照品溶液色谱图的保留时间标注对照指纹图谱中峰的化学成分。2.根据权利要求1所述的五妙水仙膏指纹图谱的检测方法，其特征在于，步骤1五妙水仙膏供试品溶液制备方法为：取10批次的五妙水仙膏样品，精密称取5g膏体，置100mL锥形瓶中，加25mL含1％盐酸的甲醇溶液，超声处理15min后抽滤得到滤液，得到的滤渣再次加25mL含1％盐酸的甲醇溶液重复提取，收集两次得到的滤液，水浴蒸干后，加含1％盐酸的甲醇溶解定容至25mL，过0.45μm微孔滤膜，得供试品溶液。3.根据权利要求1所述的五妙水仙膏指纹图谱的检测方法，其特征在于，步骤2中对照品溶液的制备方法为：取精密称定的盐酸小檗碱对照品，置于容量瓶中，用1％盐酸甲醇溶液定容至刻度，摇匀，制成0.528mg/mL的盐酸小檗碱对照品溶液。4.根据权利要求1所述的五妙水仙膏指纹图谱的检测方法，其特征在于，步骤3中，液相色谱条件为：色谱柱为YMC-Pack-ODS-A的C18色谱柱；流动相：乙腈为A相和含0.1％体积磷酸的水为B相，二极管阵列检测器，检测波长345nm，流速1mL/min，进样体积：10μL，梯度洗脱程序。5.根据权利要求1所述的五妙水仙膏指纹图谱的检测方法，其特征在于，步骤3中，梯度洗脱程序为：程序时间(min)A相体积/％B相体积/％105952455050350505046510005701000685595。6.根据权利要求1所述的五妙水仙膏指纹图谱的检测方法，其特征在于，指纹图谱中选择4个共有峰作为五妙水仙膏指纹图谱的特征峰，以这4个特征峰的峰面积作为质量评价的指标，4个共有峰中对照品盐酸小檗碱为2号峰，保留时间为33.015分钟，1号峰保留时间为2CN109490438A权利要求书2/2页31.097分钟，3号峰保留时间为38.358，4号峰的保留时间为50.876分钟。3CN109490438A说明书1/8页五妙水仙膏指纹图谱的检测方法技术领域[0001]本发明涉及一种中成药的检测方法，具体涉及五妙水仙膏指纹图谱的检测方法。背景技术[0002]指纹图谱是指某些复杂物质，比如中药，某种生物体或某种组织或细胞的DNA，蛋白质经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示其化学特征的色谱图或光谱图。中药指纹图谱是一种综合的、可量化的鉴定手