一种全血过滤的方法及用于全血过滤的滤膜结构.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109925884A(43)申请公布日2019.06.25(21)申请号201910346947.0(22)申请日2019.04.27(71)申请人南京岚煜生物科技有限公司地址211122江苏省南京市江宁区乾德路2号(72)发明人许行尚杰弗瑞·陈于沛(74)专利代理机构南京正联知识产权代理有限公司32243代理人王素琴(51)Int.Cl.B01D61/58(2006.01)权利要求书2页说明书8页附图1页(54)发明名称一种全血过滤的方法及用于全血过滤的滤膜结构(57)摘要本发明公开了一种全血过滤的方法及用于全血过滤的滤膜结构，具体包括以下步骤：(1)选择由至少两层过滤膜依次从上至下叠加构成滤膜结构，且将所述滤膜结构进行红细胞凝集素处理，待用；(2)将全血样本加入所述滤膜结构进行过滤；(3)收集过滤后的血清或血浆。滤膜结构为至少两层过滤膜从上至下叠加构成，且叠加的过滤膜从上至下的孔径逐渐变小，面积逐渐变大或相等。通过由至少两层过滤膜叠加构成的滤膜结构，且将所述滤膜结构进行红细胞凝集素处理，使全血样本中的红细胞与滤膜中红细胞凝集素相结合，被截留在滤膜结构中，从而以保证红细胞完全过滤吸附在滤膜结构中，从而实现能从非常少量的血液中有效稳定地分离出血浆/血清。CN109925884ACN109925884A权利要求书1/2页1.一种全血过滤的方法，其特征在于，具体包括以下步骤：(1)选择由至少两层过滤膜依次从上至下叠加构成滤膜结构，且将所述滤膜结构进行红细胞凝集素处理，待用；(2)将全血样本加入所述滤膜结构进行过滤；(3)收集过滤后的血清或血浆。2.根据权利要求1所述的全血过滤的方法，其特征在于，所述过滤膜为多孔结构；所述滤膜结构中叠加的过滤膜从上至下的孔径逐渐变小，面积逐渐变大或相等。3.根据权利要求1所述的全血过滤的方法，其特征在于，所述滤膜结构包括两层过滤膜，分别为上层过滤膜和下层过滤膜，所述上层过滤膜为红细胞凝集素滤膜，所述下层过滤膜由至少一层亲水性微孔膜叠加组成；或所述上层过滤膜为亲水过滤膜，所述下层过滤膜为红细胞凝集素滤膜；所述红细胞凝集素滤膜中均匀分布有红细胞凝集素。4.根据权利要求3所述的全血过滤的方法，其特征在于，所述上层过滤膜为红细胞凝集素滤膜；所述下层过滤膜为若干滤孔均匀分布且孔径大小不同的过滤膜，或所述下层过滤膜由第一下层膜和第二下层膜依次上下叠加组成，所述第一下层膜的孔径大于所述第二下层膜的孔径。5.根据权利要求3所述的全血过滤的方法，其特征在于，所述上层过滤膜为玻璃纤维滤纸或硝酸纤维素膜或聚砜膜；所述下层过滤膜为亲水性微孔膜，包括玻璃纤维滤纸或硝酸纤维素膜或聚砜膜或乙酸纤维素膜；所述步骤(2)过滤时采用上部加压或下部抽吸加快过滤速度。6.根据权利要求3所述的全血过滤的方法，其特征在于，所述红细胞凝集素滤膜是将过滤膜进行红细胞凝集素处理得到的，其制备过程为：1)将红细胞凝集素放入红细胞凝集素缓冲液中稀释；2)将所述过滤膜放入步骤1)的含有红细胞凝集素的红细胞凝集素缓冲液中润湿，然后在室温晾干，再放置于37℃～55℃温度烘箱中烘干2h以上；或将在红细胞凝集素缓冲液中润湿后的所述过滤膜进行真空抽干或冻干处理。7.根据权利要求6所述的全血过滤的方法，其特征在于，所述红细胞凝集素缓冲液为PB或Tris-HCl或CB；所述红细胞凝集素缓冲液的浓度为5mM～1M；所述红细胞凝集素滤膜中添加的红细胞凝集素的重量不少于5ng。8.根据权利要求3所述的全血过滤的方法，其特征在于，所述过滤膜在使用前需采用缓冲液进行处理，所述缓冲液为溶解BSA、氨基酸、含有表面活动性剂成分的任一种缓冲液；处理方法为：将所述过滤膜在缓冲液中润湿后，在室温晾干且干燥2h以上，待用。9.根据权利要求6所述的全血过滤的方法，其特征在于，所述上层过滤膜的孔径不小于0.45μm，所述下层过滤膜的孔径为0.2μm～4μm。10.根据权利要求9所述的全血过滤的方法，其特征在于，所述上层过滤膜的孔径为1μm～5μm；所述上层过滤膜的厚度为0.5～20mm，所述下层过滤膜的厚度为0.05～2mm；红细胞凝集素滤膜中添加的红细胞凝集素的重量为20ng～100ng。11.一种用于全血过滤的滤膜结构，其特征在于，该滤膜结构由至少两层过滤膜依次从上至下叠加构成；所述过滤膜为多孔结构；该滤膜结构中叠加的过滤膜的孔径从上至下孔径逐渐变小，面积从上至下逐渐变大或相等。2CN109925884A权利要求书2/2页12.根据权利要求11所述的用于全血过滤的滤膜结构，其特征在于，该滤膜结构包括两层过滤膜，分别为上层过滤膜和下层过滤膜，所述上层过滤膜为红细胞凝集素滤膜，所述下层过滤膜由至少一层亲水性微孔膜叠加