灵丹多糖胶囊的制作方法及其总皂苷含量测定方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN110013499A(43)申请公布日2019.07.16(21)申请号201910206524.9G01N30/02(2006.01)(22)申请日2019.03.19(71)申请人南方医科大学地址510515广东省广州市白云区沙太南路1023号-1063号(72)发明人吕志平刘强翁立冬刘莉罗超华张璐(74)专利代理机构广州新诺专利商标事务所有限公司44100代理人周端仪(51)Int.Cl.A61K36/537(2006.01)A61K9/48(2006.01)A61P1/16(2006.01)A61P37/04(2006.01)权利要求书2页说明书6页(54)发明名称灵丹多糖胶囊的制作方法及其总皂苷含量测定方法(57)摘要本发明公开了的一种灵丹多糖胶囊的制作方法及其总皂苷含量测定方法，按处方称取灵芝、丹参和黄芪；通过水提提取有效成分，提取2次，每次加药材的8-10倍量水，每次提取1.8-3h，混合煎液；浓缩干燥煎液，加入药用辅料按常规工艺制备胶囊。制得灵丹多糖胶囊，其总皂苷含量测定通过制备人参皂苷R、样品处理、显色、测定，计算灵丹多糖胶囊中总皂苷的含量。本发明的水提工艺不但操作简单，且在水提工艺中能很好保留原方用药特色，操作快，实用性好，本发明的总皂苷含量测定方法精密度、稳定性，重复性良好。CN110013499ACN110013499A权利要求书1/2页1.一种灵丹多糖胶囊的制作方法，包括以下步骤：(1)按处方称取灵芝、丹参和黄芪；(2)通过水提提取有效成分：水提工艺条件为提取2次，每次加药材的8-10倍量水，每次提取1.8-3h，混合两次的煎液；(3)浓缩干燥煎液，加入药用辅料按常规工艺制备胶囊。2.根据权利要求1所述的灵丹多糖胶囊的制作方法，其特征在于：所述步骤(1)中，按重量份数计算，灵芝4-6份、丹参4-6份、黄芪5-7份。3.根据权利要求1所述的灵丹多糖胶囊的制作方法，其特征在于：所述步骤(2)中，第一次加药材的10倍量水，第二次加药材的8倍量水，每次提取2h。4.根据权利要求1所述的灵丹多糖胶囊的制作方法，其特征在于：所述步骤(3)中，煎液滤过，减压浓缩，减压干燥，得干膏，粉碎过筛，加微晶纤维素，混合，制软材，制粒，干燥，整粒后加硬脂酸镁，混合均匀，装胶囊。5.灵丹多糖胶囊的总皂苷含量测定方法，其特征在于包括以下步骤：(1)标准品溶液制备精密称取人参皂苷Re对照品适量容量瓶中，加甲醇溶解制成每1ml含人参皂苷Re2mg的标准品溶液；(2)样品处理精密称取2.0g胶囊内容物，置于100ml容量瓶中，加水超声，再用水定容至100ml，摇匀，放置，吸取上清液1.0ml进行柱层析，其中，层析柱内装3cm大孔树脂，上加1cm中性氧化铝；层析工艺：依次用乙醇、水洗柱，弃去洗脱液，精密加入1.0ml样品溶液，用25ml水洗柱，弃去洗脱液，用70％乙醇25ml洗脱，收集洗脱液于蒸发皿中，置于水浴挥干，残渣备用；(3)显色精密吸取对照品溶液80μl置5ml带塞试管中，热风吹干，精密加入5％香草醛冰乙酸溶液0.2ml，转动蒸发皿，使残渣充分溶解，再精密加入高氯酸0.8ml，摇匀，密塞，置60℃水浴10min，取出，冰浴冷却后，准确加入冰乙酸5.0ml，摇匀，于560nm波长处测定吸光度；(4)测定取步骤(2)处理过的残渣，精密加入0.2ml含5％香草醛冰乙酸溶液，转动蒸发皿，使残渣充分溶解，再加0.8ml高氯酸，混匀后转移到5ml带塞刻度离心管中，60℃水浴10min，取出，冰浴冷却后，准确加入冰乙酸5.0ml，摇匀后，于560nm波长处与标准品进行比色测定吸收度，计算灵丹多糖胶囊中总皂苷的含量。6.根据权利要求5所述的灵丹多糖胶囊的总皂苷含量测定方法，其特征在于：所述步骤(2)中，精密称取2.0g胶囊内容物，置于100ml容量瓶中，加水超声30min，再用水定容至100ml，摇匀，放置，吸取上清液1.0ml进行柱层析，其中，层析柱内装3cmAmberlite-XAD-2大孔树脂，上加1cm中性氧化铝；先用70％乙醇25ml洗柱，弃去洗脱液，再用25ml水洗柱，弃去洗脱液，精密加入1.0ml样品溶液，用25ml水洗柱，弃去洗脱液，用70％乙醇25ml洗脱，收集洗脱液于蒸发皿中，置于60℃水浴挥干，残渣备用。7.根据权利要求5所述的灵丹多糖胶囊的总皂苷含量测定方法，其特征在于：所述步骤(2)中，层析柱采用直径1.5cm的层析柱。8.根据权利要求5所述的灵丹多糖胶囊的总皂苷含量测定方法，其特征在于：所述步骤(3)、(4)，采用紫外-可见光分光光度计进行测定吸收度。9.根据权利要求5所述的灵丹多糖胶囊的总皂苷含量测定方法，其特征在于：所述步骤(4)中，计算