一种具有缓解焦虑、改善睡眠的发酵乳制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN110269098A(43)申请公布日2019.09.24(21)申请号201910462479.3(22)申请日2019.05.30(83)生物保藏信息GDMCCNO:606052019.03.12(71)申请人江南大学地址214000江苏省无锡市滨湖区蠡湖大道1800号(72)发明人陈卫田丰伟翟齐啸韩啸于雷雷赵建新张灏(74)专利代理机构哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司23211代理人林娟(51)Int.Cl.A23C9/13(2006.01)权利要求书1页说明书8页附图7页(54)发明名称一种具有缓解焦虑、改善睡眠的发酵乳制备方法(57)摘要本发明公开了一种具有缓解焦虑、改善睡眠的发酵乳制备方法，属于乳品加工技术领域。本发明使用短乳杆菌GDMCCNo.60605、保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌混菌发酵，得到了富含γ-氨基丁酸发酵乳。利用本发明所提供的方法制备的发酵乳还具有以下效果：在旷场实验中能够显著增加小鼠进入中央区域的频率、延长小鼠在旷场中央区域的时间而不影响小鼠总运动距离；在高架十字迷宫实验中能够显著增加小鼠进入开臂的次数和在开臂停留的时间；能够延长戊巴比妥钠诱导的睡眠时间、缩短巴比妥钠诱导的睡眠潜伏期；能够调节肠道菌群，改善肠道环境，显著增加小鼠肠道中Ruminococcus、Allobaculum、Adlercreutzia的相对丰度。所述的发酵乳用于开发缓解焦虑、改善睡眠的功能食品，具有非常广泛的应用前景。CN110269098ACN110269098A权利要求书1/1页1.一种发酵乳制备方法，其特征在于，所述方法包括：将短乳杆菌GDMCCNo.60605与保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌接种到含有L-谷氨酸钠的复原乳中进行混菌发酵，发酵结束后得到发酵乳饮料。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述混菌发酵接种量数量级为107CFU/mL，其中短乳杆菌、保加利亚乳杆菌与嗜热链球菌的比例为(3～4):(0.8～1.2):(0.8～1.2)。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述含有L-谷氨酸钠的复原乳的具体成分为：每1L水中加入11％脱脂乳，5％蔗糖，0.5％酵母提取物，0.1％L-谷氨酸钠。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述发酵培养，培养条件为37℃，培养9h，4℃后熟12h。5.根据权利要求1-4任一所述的方法，其特征在于，所述富含γ-氨基丁酸的发酵乳制备方法，是使用短乳杆菌GDMCCNo.60605的冻干菌粉。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述冻干菌粉的制备方法包括：复苏活化发酵菌种后进行菌种扩大培养，获得扩大培养液并离心分离菌体，再利用生理盐水洗涤所得菌体，添加保护剂然后进行冷冻干燥得到冻干菌粉。7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述冻干菌粉的制备方法如下：1)复苏、纯化和活化发酵菌种；2)将步骤1)所得的发酵菌种进行扩大培养，获得扩大培养液并离心分离菌体；3)利用生理盐水洗涤步骤2)所得的菌体，添加保护剂然后进行冷冻干燥得到冻干菌粉。8.根据权利要求1-4任一所述的方法，其特征在于，所述方法具体步骤如下：1)将取自-80℃保存的短乳杆菌GDMCCNo.60605进行复苏、纯化和活化；2)按2％的接种量将步骤1)所得的活化的短乳杆菌GDMCCNo.60605接种到MRS液体培养基中，在37℃下培养18h，获得扩大培养液，离心分离后获得菌体；3)用0.85％的生理盐水洗涤步骤2)所得的菌体三次，再将菌体悬浮于13％脱脂乳冻干保护剂中进行冷冻干燥，得到1011CFU/g的冻干菌粉；4)按107CFU/mL的接种量将步骤3)所得的冻干菌粉与保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌以(3～4):(0.8～1.2):(0.8～1.2)的比例接种到含有L-谷氨酸钠的复原乳中，于37℃下发酵9h，在4℃后熟12h后获得发酵乳饮料；所述含有L-谷氨酸钠的复原乳的具体成分为：每1L水中加入11％脱脂乳，5％蔗糖，0.5％酵母提取物，0.1％L-谷氨酸钠。9.根据权利要求1-8任一所述方法制备得到的发酵乳。10.权利要求9所述的发酵乳的应用。所述发酵乳，具有以下性质：(1)在旷场实验中使小鼠进入中央区域的频率增加了55.4％、使小鼠在旷场中央区域的时间延长了74.3％，而不影响小鼠总运动距离；(2)在高架十字迷宫实验中能够使小鼠在开臂停留时间延长了54.2％、进入开臂的次数增加了57.2％，与空白组相比有显著性差异；(3)能够使小鼠戊巴比妥钠诱导的睡眠时间延长284.2％，使巴比妥钠诱导的睡眠潜伏期缩短26.3％，均有显著性效果。(4)能够调节肠道菌群，改善肠道环境，显著增加小鼠肠道中Ruminococcus、Allob