一种呼肠孤病毒和细小病毒卵黄抗体锭及其制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN110627899A(43)申请公布日2019.12.31(21)申请号201910954299.7C07K1/30(2006.01)(22)申请日2019.10.09(71)申请人山东天牧生物科技有限公司地址257599山东省东营市垦利经济开发区胜利路117号(72)发明人王锐(74)专利代理机构北京睿博行远知识产权代理有限公司11297代理人刘桂荣(51)Int.Cl.C07K16/04(2006.01)C07K16/10(2006.01)C07K16/08(2006.01)C07K1/36(2006.01)C07K1/34(2006.01)权利要求书1页说明书7页(54)发明名称一种呼肠孤病毒和细小病毒卵黄抗体锭及其制备方法(57)摘要本发明提供了一种呼肠孤病毒和细小病毒卵黄抗体锭及其制备方法，属于卵黄抗体锭领域。本发明采用锭制剂提取的新型呼肠孤病毒和细小病毒卵黄抗体提取率高，依次通过稀释、过滤、沉淀脂类、沉淀抗体、制软材包被、压锭的步骤，制备的卵黄抗体的纯度高，提取效率好，本发明制备的卵黄抗体在预防和治疗畜禽疾病方面具有特异性强、作用迅速、无残留等优点，尤其是在治疗与预防水禽呼肠孤病毒、细小病毒具有极佳疗效，而且，本发明的方法可以得到了广泛应用。本发明的方法来源广泛、成本低、无过敏反应且有营养作用，高免卵黄抗体锭,易于保存、运输和应用，可以用于制成各种畜禽疾病，尤其是水禽的呼肠孤病毒、细小病毒的治疗药物。CN110627899ACN110627899A权利要求书1/1页1.一种呼肠孤病毒和细小病毒卵黄抗体锭的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)饲养免疫鸡苗：选取健康的25周龄的鸡苗，隔离饲养，并在所述鸡苗的鸡翅下肌肉注射呼肠孤病毒和细小病毒灭活疫苗进行首免，然后分别进行强化免疫，所述首免后检测鸡苗的血清中抗体水平达10log2～14log2时收集鸡蛋；(2)鸡蛋的消毒冷藏：将所述鸡蛋依次进行清洗、消毒、晾干，然后置于4℃下冷藏；(3)收集蛋黄：将所述步骤(2)冷藏后的鸡蛋打蛋，并在4℃且无菌的条件下将蛋清与蛋黄分离，取蛋黄，将蛋黄搅拌均匀；(4)稀释蛋黄液：将所述步骤(3)蛋黄与水混合后置于4℃的冷藏室内静置，得到稀释蛋黄液；(5)过滤：将所述步骤(4)蛋黄稀释液过滤，取过滤液；(6)沉淀脂类物质：将所述步骤(5)过滤液、生理盐水与羧甲基纤维素混合进行沉淀，得到上清液；(7)过滤：将所述步骤(6)上清液过滤，取过滤液；(8)沉淀抗体物质：将所述步骤(7)过滤液与硫酸钠混合进行沉淀，取固体物质；(9)制锭：将所述步骤(8)固体物质、辅料、蔗糖以及β-环糊精混合，得到软材，然后依次制粒、干燥和压制成锭，得到所述呼肠孤病毒和细小病毒卵黄抗体锭。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(4)中蛋黄与水的体积比为1:2～4。3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(4)中混合后还包括杀菌，所述杀菌的过程为：将所述混合液加热至65～68℃，并保持300秒，然后在10～30秒内冷却到4～5℃。4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(6)中过滤液与生理盐水的体积比为1:2～4，所得羧甲基纤维素以羧甲基纤维素溶液的形式加入，所述羧甲基纤维素溶液的浓度为10～30g/L。5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(6)中羧甲基纤维素溶液的用量为过滤液的体积的0.3倍。6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(6)和(8)中沉淀的温度独立地为10～15℃，时间独立地为12～24h。7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(8)中硫酸钠以硫酸钠溶液的形式加入，所述硫酸钠溶液的浓度为10～30g/L。8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(9)中固体物质与辅料的质量比为1：3～1：6。9.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述蔗糖的用量为固体物质质量的15～40％，所述β-环糊精的用量为固体物质质量的1～3％。10.权利要求1～9任一项所述制备方法制得的呼肠孤病毒和细小病毒卵黄抗体锭。2CN110627899A说明书1/7页一种呼肠孤病毒和细小病毒卵黄抗体锭及其制备方法技术领域[0001]本发明涉及卵黄抗体锭技术领域，尤其涉及一种呼肠孤病毒和细小病毒卵黄抗体锭及其制备方法。背景技术[0002]水禽的新型呼肠孤病毒、细小病发病率和死亡率都很高，不仅给养殖业带来很大的危害，而且危及人类的健康。呼肠孤病毒有多种血清型，容易产生耐药性，给疾病的治疗带来了难度。尤其在现代规模化、集约化养殖小区更容易引发此病，还常和鸭肝病毒、禽流感等混合感染，引起大批量死亡，给养