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(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN110652007A(43)申请公布日2020.01.07(21)申请号201911073881.9(22)申请日2019.11.06(71)申请人满山歌茶业(西双版纳)有限公司地址666100云南省西双版纳傣族自治州景洪市龙掌路2号静园小区25幢(72)发明人李定忠沈宗毕(74)专利代理机构昆明正原专利商标代理有限公司53100代理人徐玲菊蒋文睿(51)Int.Cl.A23L33/105(2016.01)B01D15/12(2006.01)B01D15/42(2006.01)B01D11/02(2006.01)权利要求书1页说明书6页附图1页(54)发明名称一种制备茶黄素的方法(57)摘要本发明提供一种制备茶黄素的方法,其特征在于包括如下步骤:1)多酚氧化酶乳化液的制备:2)茶多酚醇溶液的制备;3)按1∶0.5~2.0的质量比,将多酚氧化酶乳化液和茶多酚醇溶液混合均匀,调节pH值至4.0~6.5,于25~35℃,并按0.5~2个单位/min的量通入空气或氧气,发酵20~80min;4)静置2~5h,取上层液,过滤,浓缩,用纯净水稀释至固型物为3%~6%;5)层析,洗脱,浓缩,干燥。使茶黄素发酵合成率高,易于纯化,且无残留,安全可靠,工艺简单,大幅度降低茶黄素的生产成本。CN110652007ACN110652007A权利要求书1/1页1.一种制备茶黄素的方法,其特征在于包括如下步骤:1)多酚氧化酶乳化液的制备:将茶鲜叶或者含外源酶的植物粉碎成泥,加入到盐液中,使茶鲜叶或者含外源酶的植物的量是盐液质量的10%~60%,再加入茶鲜叶量或者含外源酶植物量的0.02‰~0.2‰的交联聚乙烯吡咯烷酮(PVPP),混合乳化5~20min,得多酚氧化酶乳化液;2)茶多酚醇溶液的制备:在醇液中加入茶液,使茶液中的茶多酚量是醇液质量的1%~4%,混合均匀,得茶多酚醇溶液;3)按1∶0.5~2.0的质量比,将步骤1)的多酚氧化酶乳化液和步骤2)的茶多酚醇溶液混合均匀,用柠檬酸溶液调节溶液pH值至4.0~6.5,加热至25~35℃,并按0.5~2个单位/min的量通入空气或氧气,以60~150r/min的转速搅拌、发酵20~80min,得发酵液;4)将步骤3)的发酵液静置2~5h,取上层液,过滤,浓缩,在浓缩液中加入纯净水稀释溶解至固型物为3%~6%,得稀释液;5)将步骤4)的稀释液以0.5~2.0BV/h的流速上层析柱,以1~3BV/h洗脱流速,分别用纯净水、质量浓度为15%~35%的乙醇洗脱3~5个柱体积BV,再用质量浓度为60%~80%的乙醇以1~2BV/h洗脱流速洗脱2~4个柱体积BV,收集质量浓度为60%~80%的乙醇洗脱液,加入适量食品级抗氧化剂后,经截留分子量为100~500Da的膜进行浓缩或减压浓缩,浓缩液经真空冷冻干燥或真空干燥或喷雾干燥,得高纯度茶黄素。2.如权利要求1所述的制备茶黄素的方法,其特征在于所述步骤1)的盐液通过下列方法配制:在纯净水中加入盐至盐的质量浓度为10~50%,搅拌至盐完全溶解;其中盐为下列中的一种:(NH4)2SO4、NaH2PO4、K2CO3、Na2SO4、K2HPO4、Na2CO3、CaCl2、KH2PO4、NaCl。3.如权利要求1所述的制备茶黄素的方法,其特征在于所述步骤2)的醇液通过下列方法配制:在纯净水中加入醇至醇体积分数v/v为30~70%,其中醇为下列中的一种:乙醇、聚乙二醇2000、正丙醇、正丁醇。4.如权利要求1所述的制备茶黄素的方法,其特征在于所述步骤1)的含外源酶的植物为:苹果、梨、葡萄、香蕉、蓝莓、枇杷、菠萝、西瓜、橘子、橙子、桃、西瓜、芒果、猕猴桃、柿子中的一种或几种水果,且几种的配比是任意的;或者是茄子、西红柿、莲藕、马铃薯、红薯、菠菜、南瓜、山药、胡萝卜、芋头中的一种或几种蔬菜,且几种的配比是任意的;或者是四季豆、大豆中的一种豆类;或者是小米、玉米、小麦、大麦、荞麦中的一种或几种谷物;或者是木犀科连翘属落叶灌木金钟叶片。5.如权利要求1所述的制备茶黄素的方法,其特征在于所述步骤2)的茶液为绿茶提取液或者市购的茶多酚溶液,其中绿茶提取液经过下列方法制备:茶叶粉碎至过20~50目筛,按1∶10~20的料液质量比加入纯净水,于70~95℃温度下,提取30~90min,提取液降温至25~45℃,用分子量为30万Da的澄清膜进行澄清后,再经反渗透浓缩,得绿茶提取液。6.如权利要求1所述的制备茶黄素的方法,其特征在于所述步骤5)的层析柱填料为:大孔树脂D130、AB-8、D101、NKA-9、HPD300中的一种或几种,或者为MCI树脂。7.如权利要求1所述的制备茶黄素的方法,其特征在于所述步骤5)的抗氧化