一种纳米疫苗及其制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN111249453A(43)申请公布日2020.06.09(21)申请号202010119256.XB82Y5/00(2011.01)(22)申请日2020.02.26(71)申请人浙江大学地址310003浙江省杭州市西湖区余杭塘路866号(72)发明人乔逸婷郑树森陈健翔张乐乐(74)专利代理机构苏州创元专利商标事务所有限公司32103代理人范晴(51)Int.Cl.A61K39/00(2006.01)A61K39/39(2006.01)A61K45/06(2006.01)A61K47/54(2017.01)A61P37/04(2006.01)权利要求书1页说明书7页附图5页(54)发明名称一种纳米疫苗及其制备方法(57)摘要本发明涉及一种利用不饱和脂肪酸建立的包含抗原肽、免疫佐剂和小分子药物的多组分无载体一体化纳米疫苗及其方法。本发明的纳米疫苗，包括抗原，免疫佐剂和不饱和脂肪酸，所述抗原通过-SH基团共价偶联不饱和脂肪酸，所述免疫佐剂通过S-S键偶联不饱和脂肪酸。本发明利用不饱和脂肪酸修饰肿瘤靶向的抗原肽和免疫佐剂，在水溶液中以不饱和脂肪酸为疏水核心发生自组装，疏水核心内亦可装载疏水性强的小分子药物。该纳米疫苗可以提高抗原肽在淋巴结内的驻留时间，增加DC细胞对抗原肽的内吞，提高抗肿瘤免疫效果。CN111249453ACN111249453A权利要求书1/1页1.一种纳米疫苗，其包括：抗原，免疫佐剂和不饱和脂肪酸，其特征在于，所述抗原通过共价键偶联不饱和脂肪酸，所述免疫佐剂通过共价键偶联同种类或不同种类不饱和脂肪酸。2.根据权利要求1所述的纳米疫苗，其特征在于，抗原为不含半胱氨酸Cys的肽、蛋白、糖蛋白、糖肽、蛋白聚糖或其组合的形式。3.根据权利要求1所述的纳米疫苗，其特征在于，不含半胱氨酸Cys的抗原N端添加有Cys-(b)序列或Cys-(a)-(b)序列，其中，(a)为亲水性基团，(b)为组织蛋白酶的酶切位点基团。4.根据权利要求3所述的纳米疫苗，其特征在于，所述(a)为不含半胱氨酸Cys的肽段，所述(a)选自-Ser-基团、-Gly-基团、二肽–Ser-Ser-或-Ser-Gly-。5.根据权利要求3所述的纳米疫苗，其特征在于，所述(b)为选自组织蛋白酶A--Z中任一种的酶切位点氨基酸序列。6.根据权利要求1所述的纳米疫苗，其特征在于，所述抗原在N端修饰Cys-(b)序列或Cys-(a)-(b)序列后通过半胱氨酸Cys残基的-SH共价偶联不饱和脂肪酸，所述免疫佐剂通过S-S键偶联不饱和脂肪酸同种类或不同种类不饱和脂肪酸。7.根据权利要求1所述的纳米疫苗，其特征在于，所述免疫佐剂选自含有-OH的可激活DC细胞抗原呈递能力的化合物，优选地，所述免疫佐剂选自TLR信号通路激动剂，STING信号通路激动剂，且分子结构内部包含-OH基团的化合物中的一种或多种。8.根据权利要求1所述的纳米疫苗，其特征在于，免疫佐剂选自R848、CpG、咪喹莫特中的一种或多种。9.根据权利要求1所述的纳米疫苗，其特征在于，所述不饱和脂肪酸选自：单不饱和脂肪酸或多不饱和脂肪，所述单不饱和脂肪酸选自油酸、芥酸、棕榈油酸、反式油酸中的一种或多种；多不饱和脂肪，选自亚油酸、亚麻酸、花生四烯酸、二十二碳六烯酸DHA中的一种或多种。10.根据权利要求1所述的纳米疫苗，其特征在于，所述纳米疫苗还含有疏水性强的小分子药物；优选地，所述疏水性强的小分子药物选自STAT3抑制剂stattic、Artesunate青蒿琥酯、C188-9。2CN111249453A说明书1/7页一种纳米疫苗及其制备方法技术领域[0001]本发明涉及医药生物技术领域，特别涉及疫苗技术领域；具体涉及一种利用不饱和脂肪酸建立的包含抗原肽、免疫佐剂和小分子药物的多组分无载体一体化纳米疫苗。背景技术[0002]随着人口老龄化等因素的加剧，我国癌症的发病率和死亡率持续上升，癌症已成为我国人群死亡主要原因，严重危害国人健康。近年来，抗肿瘤免疫疗法发展迅猛，尤其是免疫检查点抑制剂疗法(例如：PD-1抑制剂和CTLA-4抑制剂)在临床上取得了显著的疗效。免疫检查点抑制剂疗法的主要原理是通过抗体或小分子化合物阻断肿瘤细胞和效应T细胞(CTL)之间形成的免疫抑制性复合物(例如PD-1/PD-L1，CTLA-4/B7复合物)，进而解除CTL内的免疫抑制信号，重新启动CTL对肿瘤细胞的攻击。[0003]然而，免疫检查点抑制剂疗法也具有一定的局限性。首先，药物响应性在不同肿瘤种类间差异大。造成此差异的主要原因之一是由于突变负荷低的肿瘤会产生较少的肿瘤特异性抗原(TSA)，进而弱化了肿瘤细胞自发被免疫细胞识别的效率，阻碍了免疫检查点抑制剂疗法