益母草颗粒指纹图谱的检测方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN111487344A(43)申请公布日2020.08.04(21)申请号202010344425.XG01N30/14(2006.01)(22)申请日2020.04.27(71)申请人江苏弘典中药产业研究院有限公司地址210042江苏省南京市玄武区徐庄路6号4幢申请人南京中山制药有限公司(72)发明人刁和芳郑艳萍赵开军王海丽徐董欣(74)专利代理机构南京经纬专利商标代理有限公司32200代理人楼高潮(51)Int.Cl.G01N30/02(2006.01)G01N30/86(2006.01)G01N30/06(2006.01)权利要求书1页说明书6页附图1页(54)发明名称益母草颗粒指纹图谱的检测方法(57)摘要本发明公开了益母草颗粒指纹图谱的检测方法，该方法包括以下步骤：步骤1、益母草颗粒供试品溶液的制备；步骤2、混合对照品溶液的制备：步骤3、分别精密吸取供试品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图；步骤4，将步骤3中获得的益母草颗粒指纹图谱仪器导出，并导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统，选择不同批次益母草颗粒的色谱图中均存在的色谱峰作为共有峰；用平均值计算法生成益母草颗粒的对照指纹图谱；计算各共有峰的相对保留时间、相对峰面积。本发明所提供的益母草颗粒指纹图谱，能全面，客观地表征益母草颗粒的质量。本发明提供的指纹图谱的检测方法具有方法简便、稳定、精密度高、重现性好等优点。CN111487344ACN111487344A权利要求书1/1页1.一种益母草颗粒指纹图谱的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、益母草颗粒供试品溶液的制备：取不同批次的益母草颗粒，分别精密称取益母草颗粒样品，置锥形瓶中，加甲醇，恒温超声处理，取上清液，水浴挥干，再加甲醇溶解并定容，过微孔滤膜，得供试品溶液；步骤2、混合对照品溶液的制备：精密称定5-羟甲基糠醛、芦丁、盐酸益母草碱、金丝桃苷对照品，置于容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，制成混合对照品溶液；步骤3、分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液，注入高效液相色谱仪，记录色谱图；步骤4，将步骤3中获得的益母草颗粒供试品溶液的指纹图谱导出，并导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A；选择不同批次益母草颗粒的色谱图中均存在的色谱峰作为共有峰；用平均值计算法生成益母草颗粒的对照指纹图谱，计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积；并根据混合对照品溶液色谱图的保留时间标注对照指纹图谱中峰的化学成分。2.根据权利要求1所述的益母草颗粒指纹图谱的检测方法，其特征在于，步骤1益母草颗粒供试品溶液制备方法为：取9批次的益母草颗粒，精密称取益母草颗粒样品3～9g置50～150mL锥形瓶中，加甲醇25～75mL，水温40℃超声处理60min，取上清液10～30mL，水浴挥干，用甲醇溶解挥干物并定容成2～6mL，过0.22μm微孔滤膜，得供试品溶液。3.根据权利要求1所述的益母草颗粒指纹图谱的检测方法，其特征在于，步骤2混合对照品溶液的制备：精密称取5-羟甲基糠醛、芦丁、盐酸益母草碱、金丝桃苷对照品，置于容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，制成57.49μg/mL的5-羟甲基糠醛、80.64μg/mL的芦丁、74.58μg/mL的盐酸益母草碱、74.50μg/mL的金丝桃苷的混合对照品溶液。4.根据权利要求1所述的益母草颗粒指纹图谱的检测方法，其特征在于，步骤3中，液相色谱条件为：色谱柱：YMC-PackODS-A，流动相：乙腈和0.1％磷酸水，梯度洗脱，紫外检测器，检测波长：280nm，柱温35℃，流速1.0mL/min，进样体积：10μL，梯度洗脱程序如下表：程序时间/min乙腈体积/％10.01523.005350.0025465.0050585.00100690.00100。5.根据权利要求1所述的益母草颗粒指纹图谱的检测方法，其特征在于，指纹谱图中有16个共有峰。6.根据权利要求5所述的益母草颗粒指纹图谱的检测方法，其特征在于，5-羟甲基糠醛保留时间为26.678min，为5号峰；芦丁保留时间为38.867min，为9号峰；盐酸益母草碱的保留时间为41.520min，为10号峰；金丝桃苷的保留时间为33.590min，为6号峰。2CN111487344A说明书1/6页益母草颗粒指纹图谱的检测方法技术领域[0001]本发明涉及一种中药的检测方法，具体涉及益母草颗粒指纹图谱的检测方法。背景技术[0002]指纹图谱是指某些复杂物质，比如中药，某种生物体或某种组织或细胞的DNA，蛋白质经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示其化学特征的色谱图或光谱图。中药指纹图谱是一种综合的，可量化的鉴定手段，它是建立在中药化学成分系统研究的基础上，主要用于评价