一种禽蛋中脱异丙基巴胺磷残留量的测定方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN111879870A(43)申请公布日2020.11.03(21)申请号202010683717.6G01N30/14(2006.01)(22)申请日2020.07.15G01N30/86(2006.01)G01N30/88(2006.01)(71)申请人广州海关技术中心地址510623广东省广州市珠江新城花城大道66号广东国检大厦B座(72)发明人邵琳智欧阳少伦谢守新李荀庄燕君蓝草邹游(74)专利代理机构常州西创专利代理事务所(普通合伙)32472代理人武政(51)Int.Cl.G01N30/02(2006.01)G01N30/72(2006.01)G01N30/04(2006.01)G01N30/06(2006.01)权利要求书2页说明书7页附图8页(54)发明名称一种禽蛋中脱异丙基巴胺磷残留量的测定方法(57)摘要本发明首次建立了禽蛋中脱异丙基巴胺磷残留量的测定方法。具体方法为采用乙腈为提取溶剂，经过滤柱脱脂净化后，用液相色谱‑串联质谱仪检测，外标法定量。本方法回归方程相关系数达到0.99以上，测定低限为5.0μg/kg，该方法操作简便，灵敏度高，抗干扰能力强，定性定量准确，能够为我国相关监管部门提供技术支持。CN111879870ACN111879870A权利要求书1/2页1.一种禽蛋中脱异丙基巴胺磷残留量的测定方法，其特征在于，具体步骤为：取禽蛋，去壳，均质，作为供试试料；取均质的空白样品，作为空白试料；取均质的空白样品，添加适宜浓度的标准工作液，作为空白添加试料；称取所述供试试料2g，于50mL离心管中，加乙腈12mL，涡旋混匀，超声10min，水平振荡20min，4000r/min离心5min，取上清液，残渣再加乙腈12mL，重复提取一次，合并上清液，定容至25mL，涡旋混匀，取12.5mL于刻度试管A中，42℃水浴氮气吹至2.5mL，涡旋1min，加水1mL，涡旋1min，备用；取所述备用液过EMR-Lipid小柱，在重力作用下洗脱，收集洗脱液于另一刻度试管B，加70％乙腈水溶液1mL于刻度试管A中涡旋30s，转移入EMR-Lipid小柱，收集洗脱液于刻度试管B，负压抽干；所述洗脱液于42℃水浴氮气吹至2.5mL，加水定容至4mL，涡旋混匀，供液相色谱-串联质谱测定；基质匹配标准曲线的制备方法为：取空白试料，按上述提取净化方法处理制得空白基质溶液，准确量取脱异丙基巴胺磷标准工作液适量，用空白基质溶液稀释，配制成浓度为1.0、2.0、5.0、10和20ng/mL的脱异丙基巴胺磷基质匹配系列混合标准溶液，供液相色谱-串联质谱测定；以测得特征离子峰面积为纵坐标，对应的标准溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线，求回归方程和相关系数。2.如权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述液相色谱条件为：色谱柱：C18；柱温：40℃；进样量：10μL；流速：0.3mL/min；流动相：A：水溶液，B：乙腈；梯度洗脱程序为：0min，水溶液90％，乙腈10％；4min，水溶液10％，乙腈90％；6min，水溶液10％，乙腈90％；6.1min，水溶液90％，乙腈10％；10min，水溶液90％，乙腈10％；所述质谱条件为：离子源：电喷雾离子源；扫描方式：负离子扫描；检测方式：多反应监测；喷雾电压：5500V；离子源温度：400℃；气帘气压力：35；碰撞气压力：中等；雾化气压力：50；辅助加热器压力：60；所用气体均为氮气；去簇电压DP：-70V；口电压EP：10V；碰撞池出口电压CXP：10V；定性离子对和碰撞能量：237.9>193.9，碰撞能量-18V；237.9>153.9，碰撞能量-17V；定量离子对：237.9>153.9。3.如权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述定性测定方法为：通过样品色谱图的保留时间与标准品的保留时间、各色谱峰的特征离子与相应浓度标准品各色谱峰的特征离子相对当混合标准溶液的相对丰度一致，则可判断样品中存在相应的被测物；定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差范围为：相对离子丰度＞50％，允许的相对偏差±20％；相对离子丰度＞20％至50％，允许的相对偏差±25％；相对离子丰度＞10％至20％，允许的相对偏差±30％；相对离子丰度≤10％，允许的相对偏差±50％。4.如权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述定量测定方法：取所述试样溶液和相应的所述基质匹配标准溶液，作单点或多点校准，按外标法定量，标准溶液及试样溶液中的脱异丙基巴胺磷响应值应在仪器检测的线性范围内。5.如权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述测定的结果计算和表述，采用外标法定量，按下列公式计算，所述公式中：X—试料中脱异丙基巴胺磷残留量，单位为μg/kg；A