一种禽蛋中甲硝唑残留量的测定方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114594189A(43)申请公布日2022.06.07(21)申请号202210354422.3(51)Int.Cl.(22)申请日2022.04.06G01N30/02(2006.01)G01N30/04(2006.01)(71)申请人唐山市食品药品综合检验检测中心G01N30/06(2006.01)（唐山市农产品质量安全检验检测G01N30/72(2006.01)中心、唐山市检验检测研究院）地址063000河北省唐山市路北区建华西道3号(72)发明人李宁肖琎苑中策董洁琼李艺霍路曼张谊汤思凝庞学良葛凯李文杰雷舒涵李明阳张书宏郝立武王圆圆(74)专利代理机构北京盛询知识产权代理有限公司11901专利代理师袁善民权利要求书1页说明书8页附图10页(54)发明名称一种禽蛋中甲硝唑残留量的测定方法(57)摘要本发明公开了一种禽蛋中甲硝唑残留量的测定方法，涉及分析检测技术领域。本发明以氘代甲硝唑为内标，将禽蛋样品经乙酸乙酯和甲醇混合溶液初步提取后，经80％乙腈‑水溶液和纯乙腈(色谱纯)二次提纯，然后经固相萃取净化，之后利用高效液相色谱‑串联质谱进行测定，采用内标法进行定量分析。本发明操作简单快速，省时省力，有较好的回收率和重复性，适用于大批量处理禽蛋样品，完全满足禽蛋中甲硝唑残留风险监测的需求。CN114594189ACN114594189A权利要求书1/1页1.一种禽蛋中甲硝唑残留量的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：以氘代甲硝唑为内标，将禽蛋样品经乙酸乙酯和甲醇混合溶液初步提取后，经80％乙腈‑水溶液和纯乙腈二次提纯，然后经固相萃取柱净化，之后利用高效液相色谱‑串联质谱进行测定，采用内标法进行甲硝唑定量分析。2.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：标准曲线绘制：以甲硝唑为标准品绘制标准曲线；样品前处理：以氘代甲硝唑为内标，将禽蛋样品利用乙酸乙酯和甲醇的混合溶液进行提取，然后经80％乙腈‑水溶液涡旋后待净化；净化：将待净化溶液加入固相萃取柱后，收集流出液，然后向流出液中加入纯乙腈，涡旋后再次加入固相萃取柱进行净化，将净化后的溶液过滤；采用高效液相色谱‑串联质谱测定过滤后的净化溶液，并利用内标法进行定量测定。3.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述禽蛋样品与乙酸乙酯和甲醇混合溶液的质量体积比为5g:10ml；所述乙酸乙酯和甲醇的体积比为9.5:0.5。4.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述禽蛋样品与纯乙腈的质量体积比≥5g:1ml。5.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，色谱条件为：色谱柱为KinetexF5100A；柱温：40℃；进样体积：3μl；流速为0.35ml/min；流动相：溶剂A为0.1％甲酸‑水溶液；溶剂B为0.1％甲酸‑乙腈溶液，梯度洗脱。6.根据权利要求5所述的测定方法，其特征在于，所述梯度洗脱程序为：7.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，质谱条件：电喷雾离子源模式；电喷雾电压5500V；离子源温度：550℃；气帘气：35psi；碰撞气：Medium；辅助气1：50psi；辅助气2：50psi；检测方式为多反应监测模式扫描。8.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述初步提取的步骤包括涡旋、超声及离心。9.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述固相萃取柱为PRiMEHLB固相萃取柱。2CN114594189A说明书1/8页一种禽蛋中甲硝唑残留量的测定方法技术领域[0001]本发明涉及分析检测技术领域，特别是涉及一种禽蛋中甲硝唑残留量的测定方法。背景技术[0002]甲硝唑对人体有多种毒副作用，尤其是具有潜在致癌性和致遗传性变异作用，而且甲硝唑进入人体后能快速分布全身，对人体造成损伤，长期服用甲硝唑可引起消化系统、神经系统症状，机体白细胞减少，抵抗力下降，容易导致疾病的发生。因此，对食品中甲硝唑残留的检验是非常必要的。[0003]禽蛋是人们普遍食用的食品，目前，供人们普遍食用的禽蛋主要有鸡蛋、鸭蛋、鹅蛋、鹌鹑蛋，这些蛋禽的养殖集约化程度越来越高，养殖过程中蛋禽的生殖系统疾病也逐渐增多，而甲硝唑具有抗厌氧菌的作用，与常用抗生素合用无拮抗作用，对治疗蛋禽生殖系统疾病及一些传染病引起的生殖系统炎症效果较好。禽蛋中含有甲硝唑成分，一般与养殖户在蛋禽饲喂过程中的用药有关，消费者在不知情的情况下长期食用含有甲硝唑的禽蛋，人体会产生一定的抗药性，影响身体健康。因而市场监督管理部门把甲硝唑作为一项重要的检测项目。检测禽蛋中甲硝唑的残留目前没有相应的国标方法，而禽蛋中甲硝唑残留检测方法的研究报道也较少。此外，甲硝唑药物残留检测方法中多应用乙酸乙酯或者不同比例乙腈‑水溶液为提取液，乙酸乙酯虽然提取禽蛋中