嗜酸乳杆菌NM产生的细菌素、制备方法及其应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN112175053A(43)申请公布日2021.01.05(21)申请号202011053482.9(22)申请日2020.09.29(71)申请人内蒙古普泽生物制品有限责任公司地址010000内蒙古自治区呼和浩特市金川开发区工业园西区(72)发明人孙洁宇李翠平邓翔(74)专利代理机构北京商专润文专利代理事务所(普通合伙)11317代理人邢若兰(51)Int.Cl.C07K14/335(2006.01)C12P21/00(2006.01)A61K38/16(2006.01)A61P31/04(2006.01)C12R1/23(2006.01)权利要求书1页说明书5页附图3页(54)发明名称嗜酸乳杆菌NM产生的细菌素、制备方法及其应用(57)摘要本发明公开了嗜酸乳杆菌NM产生的细菌素、制备方法及其应用。该细菌素由嗜酸乳杆菌NM在发酵生长期内高产合成，能够抑制革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌，可应用于光谱抑菌药物制剂或组合物的制备，特别是应用于抑制大肠杆菌药物的制备中。本发明的细菌素具有较强的耐热、耐酸性，可以被蛋白酶降解，不会在人体残留，具有高度的安全性，且具有广谱抑菌活性的效果。CN112175053ACN112175053A权利要求书1/1页1.嗜酸乳杆菌NM产生的细菌素，其特征在于，由嗜酸乳杆菌NM在发酵生长期内高产合成，能够抑制革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。2.嗜酸乳杆菌NM产生的细菌素的制备方法，其特征在于，将已活化的嗜酸乳杆菌NM接种到MRS液体培养基中37℃培养16～26h。3.根据权利要求2所述的嗜酸乳杆菌NM产生的细菌素的制备方法，其特征在于，将已活化的嗜酸乳杆菌NM接种到MRS液体培养基中37℃培养20h。4.根据权利要求2所述的嗜酸乳杆菌NM产生的细菌素的制备方法，其特征在于，将所述MRS液体培养基调至PH<7。5.嗜酸乳杆菌NM产生的细菌素在制备广谱抑菌药物中的应用。6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，在制备抑制枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、藤黄微球菌、大肠杆菌、沙门氏菌和单增李斯特菌的药物中的应用。7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，在制备抑制大肠杆菌的药物中的应用。8.根据权利要求1所述的嗜酸乳杆菌NM产生的细菌素，其特征在于，能够被胃蛋白酶和胰蛋白酶降解。2CN112175053A说明书1/5页嗜酸乳杆菌NM产生的细菌素、制备方法及其应用技术领域[0001]本发明涉及生物制药技术领域，特别涉及嗜酸乳杆菌NM产生的细菌素、制备方法及其应用。背景技术[0002]近些年来，随着广谱抗生素的过量使用导致许多致病菌对抗生素产生了耐药性，由此人们对以后如何控制这些致病菌有很大的担忧。而细菌素作为一种天然生物抑菌剂，在治疗领域的巨大潜力一直吸引着人们对它的关注。细菌素是细菌在代谢过程中由核糖体合成的具有抗菌作用的蛋白质或者多肽，具有较好的选择性杀菌效果。在消化道内被各种酶所分解，不会在动物体内蓄积而引起不良反应，无副作用、无残留、无抗药性，不污染环境，在生物制药中有广阔前景。[0003]然而，大多数细菌素的抑菌谱较窄，只能作用于与其亲缘关系较近的革兰氏阳性菌，随着研究的不断深入，许多研究发现嗜酸乳杆菌有广谱抑菌性，不仅可以抑制革兰氏阳性菌，还可以抑制革兰氏阴性菌和真菌，具有广泛的应用前景。此外，多数乳酸菌细菌素产量较低，无法满足应用需求。[0004]因此，需要开发出一种能够高产且广谱细菌素，为细菌素的开发应用奠定基础。发明内容[0005]根据本发明的一个方面，提供了嗜酸乳杆菌NM产生的细菌素，由嗜酸乳杆菌NM在发酵生长期内高产合成，能够抑制革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。[0006]本申请的嗜酸乳杆菌NM产生的细菌素，其有益效果是，细菌素的产量提升，能够满足应用需求，其对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都具有抑菌作用，是一类具有广谱抑菌活性的细菌素，具有广泛的应用前景。[0007]本发明的嗜酸乳杆菌NM已保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏号：CGMCCNo.4472，保藏日期：2010.12.14，保藏地址：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。[0008]嗜酸乳杆菌NM产生的细菌素的制备方法，将已活化的嗜酸乳杆菌NM接种到MRS液体培养基中37℃培养16～26h。嗜酸乳杆菌NM培养6h后进入对数生长期；16h～24h进入稳定期；24h后菌体生长进入衰亡期。而在菌体进入对数生长期时，细菌素逐渐产生，随着时间的增加，细菌素的产量也在不断提高。而26h之后，细菌素的产量呈现下降趋势。[0009]在一些实施方式中，嗜酸乳杆菌NM产生的细菌素的制备方法，是将已活化的嗜酸乳杆菌接种到MRS液体培养基中37℃培养20h。其有益效果是，当培养