一种多肽成像探针及其制备方法和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN112794917A(43)申请公布日2021.05.14(21)申请号202110126541.9A61K49/00(2006.01)(22)申请日2021.01.29(71)申请人国家纳米科学中心地址100190北京市海淀区中关村北一条11号(72)发明人王浩安红维王曼迪吕甘田(74)专利代理机构北京品源专利代理有限公司11332代理人巩克栋(51)Int.Cl.C07K19/00(2006.01)C07K1/13(2006.01)C09K11/06(2006.01)C09K11/02(2006.01)G01N21/64(2006.01)权利要求书1页说明书7页序列表4页附图9页(54)发明名称一种多肽成像探针及其制备方法和应用(57)摘要本发明提供了一种多肽成像探针及其制备方法和应用，所述多肽成像探针包括受体识别肽段、自组装肽段和信号分子；所述多肽成像探针通过受体识别肽段与受体识别结合、触发自组装肽段发生自组装并由信号分子发出信号。本发明的多肽成像探针经肿瘤微环境响应自组装形成纳米纤维，相较于小分子成像剂具有高富集、长滞留的优点，所述多肽成像探针随着时间的延长不易被代谢、具有长效滞留效应，在靶向部位呈现高信噪比，且所需剂量低，显著降低了对代谢器官的毒性，为成像的转化和发展提供了新思路和新方法。CN112794917ACN112794917A权利要求书1/1页1.一种多肽成像探针，其特征在于，所述多肽成像探针包括受体识别肽段、自组装肽段和信号分子；所述多肽成像探针通过受体识别肽段与受体识别结合、触发自组装肽段发生自组装并由信号分子发出信号。2.根据权利要求1所述的多肽成像探针，其特征在于，所述受体识别肽段识别的受体包括整合素、上皮细胞粘附分子、叶酸受体、碳酸酐酶XI、表皮生长因子受体或T细胞表面受体中的任意一种或至少两种的组合，优选为整合素和/或上皮细胞粘附分子，进一步优选为αvβ3和/或EpCAM；优选地，所述受体识别肽段为亲水性受体识别肽段，包括SEQIDNO:1～4之一所示的氨基酸序列。3.根据权利要求1或2所述的多肽成像探针，其特征在于，所述自组装肽段为可溶性自组装肽段，包括SEQIDNO:5～13之一所示的氨基酸序列。4.根据权利要求1‑3任一项所述的多肽成像探针，其特征在于，所述信号分子的标记位点包括肽链的末端氨基酸，优选为肽链的氨基末端氨基酸；优选地，所述信号分子的标记位点包括肽链的非末端氨基酸，优选为赖氨酸氨基端和/或半胱氨酸巯基端。5.根据权利要求1‑4任一项所述的多肽成像探针，其特征在于，所述信号分子包括荧光分子，优选为近红外荧光分子和/或短波长荧光分子；优选地，所述近红外荧光分子包括Cy7、ICG或BODIPY中的任意一种或至少两种的组合；优选地，所述短波长荧光分子包括TPE和/或NBD。6.一种权利要求1‑5任一项所述的多肽成像探针的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：固相合成包含受体识别肽段和自组装肽段的肽链，在所述肽链上修饰信号分子，得到所述多肽成像探针。7.权利要求1‑5任一项所述的多肽成像探针在制备细胞成像剂和/或实体瘤成像剂中的应用。8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述实体瘤包括肾癌、乳腺癌或肝癌中的任意一种或至少两种的组合。9.一种细胞成像方法，其特征在于，所述方法包括：将权利要求1‑5任一项所述的多肽成像探针与细胞共培养，随后进行共聚焦成像。10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述细胞表达所述多肽成像探针的受体识别肽段识别的受体；优选地，所述多肽成像探针的浓度为10～50μM；优选地，所述共培养的时间为0.5～4h。2CN112794917A说明书1/7页一种多肽成像探针及其制备方法和应用技术领域[0001]本发明属于纳米生物医药技术领域，涉及一种多肽成像探针及其制备方法和应用，尤其涉及一种识别细胞受体的原位自组装多肽成像探针及其制备方法和在细胞成像和/或活体成像中的应用。背景技术[0002]恶性肿瘤(癌症)是严重威胁人类生命健康的疾病。在癌症的临床治疗中，利用成像探针对肿瘤病灶进行成像，有利于实现早期诊断、病灶定位、术中导航等目的。然而，传统的小分子成像剂如吲哚菁绿(ICG)、亚甲蓝(MB)等，存在富集效率低、滞留时间短、荧光信噪比弱、使用剂量高等缺点，可能导致假阳性结果、代谢器官毒性高、限制手术时间等问题。[0003]CN110665016A公开了一种成像探针，包括靶向识别单元、酶水解底物单元、自组装单元和信号分子，所述酶水解底物单元为含有功能酶底物的多肽序列，所述多肽序列为PLGYLG或GPA，所述靶向识别单元、酶水解底物单元和自组装单元通过酰胺键依次相连，所述信号分子与自组装单元