最新精编医学专题—流式细胞术及其科研应用.ppt

流式细胞术及其科研(kēyán)应用流式细胞仪的原理(yuánlǐ)流式细胞术的基本概念流式细胞术的特点(tèdiǎn)流式细胞仪的检测(jiǎncè)范围当前(dāngqián)流式细胞分析发展趋势散射光信号(xìnhào)外周全血细胞散射光双参数(cānshù)点图（红细胞溶解后）流式细胞仪的检测(jiǎncè)信号荧光(yíngguāng)信号数据分析数据分析数据分析数据分析流式细胞仪的应用(yìngyòng)临床研究:血液、肿瘤、药理、免疫(miǎnyì)….生物学研究：遗传、生殖、微生物、细胞生物、毒理、分子生物、….环境研究：海洋生态研究….制药工业食品工业农业畜牧业流式细胞仪的临床(línchuánɡ)应用(免疫)流式细胞仪的临床(línchuánɡ)应用(血液)流式细胞仪的临床(línchuánɡ)应用(肿瘤)流式细胞仪的科研(kēyán)应用淋巴细胞亚群分析(fēnxī)淋巴细胞亚群分析(fēnxī)常见疾病的T淋巴细胞的变化(biànhuà)：常见疾病的T淋巴细胞的变化(biànhuà)淋巴细胞亚群双色分析(fēnxī)AIDS病人(bìngrén)T亚群分析先天性无r球蛋白血症淋巴细胞活化(huóhuà)功能研究T淋巴细胞活化(huóhuà)T细胞激活抗原表达(biǎodá)的动力学曲线活化(huóhuà)的淋巴细胞分泌细胞因子FastImmuneAssaySystem快速全面检测(jiǎncè)淋巴细胞功能BDFastImmuneActivationSystem快速(kuàisù)免疫活化检测系统优点应用(yìngyòng)实例：HIV病例T细胞活化检测BDFastImmuneCytokineSystem快速免疫(miǎnyì)细胞因子检测系统优点应用实例：分析1型与2型免疫(miǎnyì)反应CytometricBeadsArray(CBA)流式液相多重蛋白定量(dìngliàng)技术导言(dǎoyán)CBA技术(jìshù)简介BDCytometricBeadArrayHumanTh1/Th2LymphokineCBAHumanTh1/Th2LymphokineCBAHumanTh1/Th2CytokineCBAKit10pg/ml20pg/ml40pg/ml80pg/ml156pg/ml312pg/ml625pg/ml1250pg/ml2500pg/ml操作步骤CBA分析(fēnxī)软件与传统的ELISAs检测(jiǎncè)相比HumanAllergyMediatorKit使用Prostate-specificantigen（PSA-3）及其突变体PSA-3A对前列腺癌患者T细胞免疫通过HumanTh1/Th2CytokineCBAKit检测(jiǎncè)免疫T细胞的细胞因子分泌水平ABC为稀释标准D为无处理对照组E为PSA-3A处理组F为PSA-3处理组摘自TerasawaHetal.ClinicalCancerResearch.Vol.841-53January2002上述研究发现PSA-3A比PSA-3能更有效的杀伤前列腺肿瘤与PSA-3A能刺激T细胞分泌更高水平的IL-2、IL-4、IL-5和IFN-γ有关为后续药物开发打下基础CBA新产品(chǎnpǐn)系列－CBAFlexSetCBAFlexSet的分析(fēnxī)软件－FCAPArraySoftwareCBAKit与CBAFlexSetCBA/CBAFlexset的应用领域现有(xiànyǒu)CBAKit产品信号传导类树突状细胞(xìbāo)（DendriticCellDC）DC的分化(fēnhuà)和成熟树突状细胞(xìbāo)的可塑性DC的表面(biǎomiàn)标志人外周血DC亚群的鉴定(jiàndìng)监控(jiānkònɡ)DC成熟度小鼠DC细胞凋亡(diāowánɡ)检测细胞(xìbāo)凋亡的分析细胞凋亡(diāowánɡ)的分析细胞(xìbāo)凋亡——PI分析细胞(xìbāo)凋亡——ActiveCaspases-3细胞(xìbāo)凋亡——Caspases-3细胞(xìbāo)凋亡——AnnexinⅤ细胞(xìbāo)凋亡——AnnexinⅤ凋亡(diāowánɡ)检测（AnnexinV/PI法）凋亡(diāowánɡ)检测（BrdU法）细胞(xìbāo)凋亡——BrdU流式分选与分子生物学研究(yánjiū)流式分选与分子生物学研究(yánjiū)流式与分子生物学-FISH分选后的细胞(xì