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一种细菌多糖-蛋白结合疫苗及其制备方法.pdf
2023-10-22
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猫巷****松臣
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本发明涉及一种具有免疫原性的细菌多糖-蛋白结合疫苗，具体讲，涉及一种采用重组轮状病毒蛋白与细菌多糖以共价键连接的结合疫苗，本发明还涉及一种编码本发明所述重组轮状病毒蛋白的核苷酸序列、重组表达系统、重组表达系统所表达的蛋白，以及这种结合疫苗的制备方法。本发明还涉及一种肺炎球菌多糖-重组轮状病毒蛋白结合疫苗。其中，细菌多糖以共价键与重组轮状病毒表面蛋白相连接，所述的重组轮状病毒蛋白选自P基因型轮状病毒蛋白的部分氨基酸序列或全序列、G基因型轮状病毒蛋白的部分氨基酸序列或全序列。
2023-10-22
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轮状病毒多糖‑蛋白结合疫苗及其制备方法.pdf
本发明公开了轮状病毒多糖‑蛋白结合疫苗，其为多价肺炎球菌多糖与两种或两种以上的载体蛋白经连接体而成的缀合疫苗，其中，连接体为磁性纳米微球，载体蛋白之一为轮状病毒蛋白。该轮状病毒多糖‑蛋白结合疫苗的制备方法将多价肺炎球菌多糖与两种或以上的载体蛋白(其一为轮状病毒载体蛋白)分别与磁性纳米微球经偶联而成。本发明提供的轮状病毒多糖‑蛋白结合疫苗制备工艺简单，采用纳米微球为连接物的轮状病毒多糖‑蛋白结合疫苗能够增强小鼠Th1型免疫应答，以及多糖特异性抗体的免疫持效性、特异性和亲和性，此外还可诱导小鼠产生轮状病毒抗体
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本发明公开了一种多糖蛋白结合疫苗中多糖蛋白结合位点结合率的测定方法：(1)标准品的酶解；(2)固相萃取富集目标肽段；(3)高效液相色谱串联质谱分析；(4)绘制标准曲线，得标准工作曲线方程；(5)样品检测，计算得到样品中各特征肽段的浓度；(6)计算各特征肽段的多糖结合率、各位点蛋白残留率。本发明实现了多糖蛋白结合疫苗多糖蛋白结合率的多位点定量监测，其中破伤风蛋白涉及20个监测位点，CRM197涉及16个监测位点。本发明不仅可以检测残留蛋白含量，还可以评价多糖蛋白结合疫苗多糖蛋白结合位点的结合率，也可用于多糖
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