鸡传染性法氏囊病病毒JS株VP2蛋白重组腺病毒的构建及其免疫特性.docx

鸡传染性法氏囊病病毒JS株VP2蛋白重组腺病毒的构建及其免疫特性
鸡传染性法氏囊病病毒（InfectiousBursalDiseaseVirus，IBDV）是一种严重危害家禽健康的病毒，主要侵袭鸡的法氏囊，并造成严重的免疫系统损害。目前，采用疫苗注射的方式对鸡进行预防，已成为预防鸡传染性法氏囊病的有效手段。然而，传统疫苗制备的过程中存在一定的缺陷，如毒力不稳定、高温易于失活等问题，因此需要开发新型的疫苗制备技术。
基因重组技术是一种较为常用的疫苗制备技术，它通过将目标抗原基因克隆到一个适宜的表达载体中，实现该抗原的大规模高效表达，从而获得具有免疫学活性的重组蛋白并保存其免疫抗原性。
本研究中，我们利用基因重组技术，以鸡传染性法氏囊病病毒JS株VP2蛋白为目标，构建了重组腺病毒表达载体，并进行了相应的免疫学特性分析。
首先，通过RT-PCR扩增JS株VP2基因，并将其插入到重组载体pShuttle-CMV-MCS-EF1α-GFP中，并鉴定其正确性和方向性。随后，将重组载体转化至293细胞中，利用腺病毒耐受力技术，通过包装质粒Helper构建重组腺病毒Ad-CMV-VP2，并收集病毒上清液进行检测。
最后，利用对新制备的VP2蛋白进行的Westernblotting和ELISA分析，发现其能够表达且具有较高的免疫原性。使用实验室内部鸡作为实验对象进行了免疫实验，发现对重组VP2蛋白进行免疫后，其能够比较有效地刺激免疫系统产生抗体反应。
综合研究结果表明，通过基因重组技术构建的重组腺病毒表达载体能够成功地表达免疫活性VP2蛋白，同时该蛋白能够有效地刺激小鸡的免疫系统产生抗体反应，显示出了一定的应用前景。
总之，本研究为新型疫苗制备技术提供了参考，同时对鸡传染性法氏囊病的防控也有着积极的推进意义。