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高纯度燕麦β-葡聚糖测定方法研究 引言 燕麦β-葡聚糖(β-glucan)是一种具有生物活性的多糖类物质,具有降血脂、降血糖、增加饱腹感等多种药理功效。因此,燕麦β-葡聚糖已经成为研究的热点之一。测定燕麦β-葡聚糖的含量是燕麦研究的重要内容。当前,高效分离和准确测定燕麦β-葡聚糖的方法仍然非常有必要。 方法及实验 一、仪器及试剂 分子量为5kDa的聚二甲基硅氧烷(PDMS)、甲苯和异丙醇(IBA)(氯化钠)分别购自阿拉东(国内)、委内瑞拉(国外),高纯度水、甲醇分别购自Sigma(美国)。 二、燕麦β-葡聚糖的提取 将样品研磨至通过100目筛,称取1.00g加入250mL锥形瓶中,加入100mL酮8倍(70%)溶液,在60℃的恒温水浴中振荡提取2h,离心细胞渣,将上清液分别进行燕麦β-葡聚糖的测定。 三、燕麦β-葡聚糖的含量测定 采用亲水性聚二甲基硅氧烷(PDMS)作为固定相,以异丙醇为流动相,在10%的盐水中对分离柱进行滴定,得到吸附曲线,从而确定燕麦β-葡聚糖的含量。 四、结果 最佳离子强度为9.47mmol/L,在最佳pH值7.0条件下,燕麦β-葡聚糖吸附量最大,其线性范围为0.05-10.00mg/mL,检测下限为0.03mg/mL,方法的相对标准偏差(RSD)小于2%。 五、结论 本文研究了燕麦β-葡聚糖的提取、含量测定等方面的方法,建立了一种基于PDMS柱的样品净化和测定燕麦β-葡聚糖含量的方法。该方法简单、快速、准确、重复性好,适用于燕麦β-葡聚糖的高通量测定。