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应用不同方法测定发酵液中的糖含量 糖是发酵过程中的重要组成部分,可以被微生物利用为能量来源和生长必需物质。因此,在发酵过程中,糖的含量是生产成功的重要指标。测定发酵液中的糖含量主要是通过化学方法和物理学方法来实现的。本论文将讨论常见的测定糖含量的方法,包括差减法、硫酸铜还原法、Fehling试剂法、酶法和高效液相色谱法。 差减法是一种常用的糖含量测定方法。它基于测定糖的比色反应,通过测定样品加升糖后的光密度与加样品后的光密度之差来计算糖的含量。差减法适用于各种糖的测定,但是对糖酯和其他物质的影响较大,可能会导致结果的偏差。 硫酸铜还原法是一种通过测定糖的还原能力来测定糖含量的方法。它基于氧化还原反应,硫酸铜还原法将糖与碱性铜硫酸溶液一起加热,使得糖还原铜离子生成红色氧化铜沉淀。硫酸铜还原法适用于单糖和还原糖的测定,但是非还原性糖的含量无法测定。 Fehling试剂法是硫酸铜还原法的改良版,常用于测定还原糖的含量,能够优化硫酸铜还原法的测定范围。它将碱性铜硫酸溶液和酐类试剂混合,在加热后产生红色沉淀,从而测定还原糖的含量。Fehling试剂法的缺点是试剂的制备较为麻烦,不适用于非还原性糖和某些酐类的测定。 酶法是广泛应用于糖含量测定的方法,它利用特定酶对糖的选择性分解来测定糖的含量。酶法的种类较多,其中最常用的是葡萄糖氧化酶法和酸水解/葡萄糖酸酶法。葡萄糖氧化酶法可以测定葡萄糖、果糖和蔗糖等含有还原性糖的物质,酸水解/葡萄糖酸酶法则可以测定多糖和非还原性糖的含量。酶法测定糖含量具有准确性高、灵敏度高、特异性强的优点,但是对于样品的预处理和试剂的使用,严格的控制必要性较高。 现代高效液相色谱法(HPLC)是测量糖含量的一种精确方法。HPLC可以对样品中的不同糖进行分离并确定其浓度。它的优点是快速、精确、准确和灵敏。但是,需要高品质的试剂和复杂的仪器,成本较高,不适用于一般实验室及大规模制造同步进行。 总之,测定发酵液中的糖含量需要根据不同实验室的需求和条件,选择适当的方法。对于实验室条件相对较差的场合,差减法和硫酸铜还原法是不错的选择。对于高质量、高准确度和大批量测量,HPLC则是首选方法。