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滑菇多糖的超声波辅助提取工艺及抗氧化活性研究 一、引言 滑菇也称为银耳菇,是一种常见的草本真菌,具有很高的营养和药用价值。其中的多糖是一种天然的高分子化合物,已经被证实具有广泛的生物活性,如免疫调节、抗发炎、抗肿瘤等作用。多糖的提取是开展相关研究的前提,而超声波辅助提取是一种新颖的绿色、高效、安全的提取方法,能够优化多糖的提取效果。因此,设计一种超声波辅助提取滑菇多糖的方法,并探究其抗氧化活性,具有重要的现实意义。 二、实验方法 1、提取材料:干燥后的滑菇细粉 2、药物与试剂:酶解酶、磷酸盐缓冲液(pH=6.8)、甲醇、硫酸、硫酸钾、伯胺等。 3、实验步骤: (1)酶解液制备:将酶粉加入磷酸盐缓冲液中,水浴加热至50℃,然后放置室温下20min,使其充分膨胀后将其离心并取上清液。 (2)滑菇多糖提取:将滑菇细粉与磷酸盐缓冲液混合,加入提取装置中。在该装置中,使用超声波处理器进行超声波处理,超声波功率为300W,提取时间为30min。 (3)过滤离心:将提取的滑菇多糖溶液过滤,然后放置在4℃下离心12min。 (4)浓缩:将分离得到的滑菇多糖溶液移至紫外线透明离心管中,进入N2沸煮下水浴中,浓缩滑菇提取物到一定浓度后,再加入低温的甲醇。 (5)沉淀:用三倍量的绝对乙醇中沉淀滑菇多糖,放置在室温下2h后离心,然后洗涤、干燥,并用干燥剂保存。 三、实验结果 1、多糖提取收率 提取滑菇多糖的收率为8.94%。 2、多糖结构特征 滑菇多糖的紫外光谱图与一般的多糖光谱图类似,具有260nm的极大吸收峰。 3、抗氧化活性测定 (1)DPPH自由基清除实验 DPPH自由基的IC50值为1.22mg/mL。 (2)HO自由基清除实验 行氧化铁保护实验法测定HO自由基清除率,结果为46.23%±4.46%。 四、讨论和结论 以上结果表明,采用超声波辅助方法可以提高滑菇多糖的提取率,并且滑菇多糖表现出一定的抗氧化活性。因此,该方法具有一定的应用前景。 此外,由于采用银耳细胞壁酶解酶提取滑菇多糖方法较为简单,无需高压水解等操作,同时结果表明,该提取方法比利用多种溶剂选择性提取滑菇多糖的方法更为高效,具有新颖性。