一种大丽轮枝菌的致病相关蛋白VdSENP1及其编码基因.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号(10)申请公布号CN104447965A(43)申请公布日(43)申请公布日2015.03.25(21)申请号201310424509.4C12N1/21(2006.01)(22)申请日2013.09.17C12N15/11(2006.01)C12N1/14(2006.01)(83)生物保藏信息C12R1/645(2006.01)CGMCCNO80562013.08.13(71)申请人中国科学院微生物研究所地址100101北京市朝阳区北辰西路1号院3号(72)发明人郭惠珊赵云龙(74)专利代理机构北京纪凯知识产权代理有限公司11245代理人关畅(51)Int.Cl.C07K14/37(2006.01)C12N15/31(2006.01)C12N15/63(2006.01)C12N5/10(2006.01)C12N1/15(2006.01)权利要求书1页说明书12页C12N1/19(2006.01)序列表8页附图4页(54)发明名称一种大丽轮枝菌的致病相关蛋白VdSENP1及其编码基因(57)摘要本发明公开了一种大丽轮枝菌致病相关蛋白VdSENP1及其编码基因与应用。该蛋白VdSENP1，是具有下述氨基酸残基序列之一的蛋白质：1）序列表中的SEQID№.2的氨基酸残基序列；2）将序列表中的SEQID№.2的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与真菌致病相关的由1)衍生的蛋白质。本发明的蛋白和其编码基因对培育抗黄萎病棉花，以及提高棉花产量和品质具有十分重要的意义。CN104447965ACN104447965A权利要求书1/1页1.一种蛋白，是如下1）或2）的蛋白：1）序列表中的SEQID№.2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；2）将序列表中的SEQID№.2的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与真菌致病相关的由1)衍生的蛋白质。2.权利要求1所述蛋白的编码基因。3.根据权利要求2所述的编码基因，其特征在于：所述编码基因具有下述核苷酸序列之一：1）序列表中SEQID№：1的第383-3577位核苷酸所示的核苷酸序列；2)序列表中SEQID№.1所示的核酸序列；3）编码序列表中SEQID№：2蛋白质序列的多核苷酸序列；4）在高严谨条件下可与序列表中SEQID№：1限定的DNA序列杂交的核苷酸序列；5）与1）或2）或3）或4）限定的DNA序列具有90％以上同源性，且编码相同功能蛋白质的DNA序列；具体的，所述同源性为95%以上；再具体的为96%以上；再具体的为97%以上；再具体的为98%以上；再具体的为99%以上。4.含有权利要求2或3所述的编码基因的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌；所述重组载体具体为重组表达载体或重组克隆载体。5.扩增权利要求2或3所述编码基因全长或其任意片段的引物对。6.权利要求1所述的蛋白和权利要求2-3任一所述的编码基因和权利要求4所述的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌在提高大丽轮枝菌的致病性中的应用。7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于：所述致病性是指引起棉花的黄萎病。8.一株致病性降低的大丽轮枝菌，其保藏编号为CGMCCNO.8056。9.抑制大丽轮枝菌中权利要求1所述的蛋白表达或抑制大丽轮枝菌中权利要求2-3任一所述的编码基因表达的方法或产品在降低大丽轮枝菌的致病性中的应用。10.权利要求1所述的蛋白或权利要求2-3任一所述的编码基因作为靶点在降低大丽轮枝菌的致病性中的应用。2CN104447965A说明书1/12页一种大丽轮枝菌的致病相关蛋白VdSENP1及其编码基因技术领域[0001]本发明属于生物技术领域，具体涉及一种大丽轮枝菌（VerticilliumdahliaeKleb.）致病相关蛋白及其编码基因。背景技术[0002]由土壤丝状真菌大丽轮枝菌（VerticilliumdahliaeKleb.）所引起的棉花黄萎病是威胁棉花生产的主要病害，多年来一直严重影响着我国棉花的品质和产量。棉花黄萎病1914年始见于美国的费吉尼亚州，随后在其它州和世界各植棉国先后发现(沈其益，1992),1935年随引进美棉品种传入我国，但危害不重。到二十世纪50年代以后，黄萎病在我国南北局部棉区陆续发生，扩散蔓延速度加快。80年代末，黄萎病已遍及全国478个植棉县(市)。进入90年代以来，我国棉花黄萎病扩展蔓延迅猛，尤其是1993,1995,1996,2002年在全国范围内连续大发生，损失严重。至今，我国大部分主产棉区己成为黄萎病重病区。[0003]黄萎病致病菌大丽轮枝菌(VerticilliumdahliaeKleb.)，属半知菌亚门，丛梗抱目，淡色孢科，轮枝菌属。大丽