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巴斯德毕赤酵母表达人溶菌酶分批发酵工艺研究
随着人类社会的发展，医药学科和生物科学也在不断的进步和发展。其中，在医药领域，溶菌酶是一种具有重要研究意义和药用价值的蛋白质。溶菌酶的作用主要在于破坏细菌细胞壁，可作为治疗感染性疾病的一种潜在药物。因此，研究溶菌酶的产生和增量化方法具有重要的理论意义和应用价值。而本文研究以巴斯德毕赤酵母表达人溶菌酶为主要研究内容，探讨了分批发酵工艺的优缺点，为溶菌酶的产量提高提供了实践经验。
一、巴斯德毕赤酵母表达人溶菌酶简介
人溶菌酶是一种广泛存在于多种生物种类中的蛋白质，是一种水解β-（1,4）-N-乙酰葡糖胺醛酸-（NAM-NAG）结构的细菌细胞壁，对细菌具有良好的杀菌作用。因此人溶菌酶已经广泛应用于食品、医药和生物技术等领域。其中医药领域的人溶菌酶主要用于治疗各种病原微生物感染。
巴斯德毕赤酵母是一种能够经表达后产生大量人溶菌酶的酵母菌株，是制备人溶菌酶的常用菌株之一。巴斯德毕赤酵母表达人溶菌酶的工作方式是：将人溶菌酶基因连接到酵母菌表达的载体上，然后将载体导入到巴斯德毕赤酵母中，通过诱导表达出高量的人溶菌酶。
二、巴斯德毕赤酵母表达人溶菌酶的分批发酵工艺流程
1.培养基的制备
酵母菌的生长培养基是巴氏液体培养基（YPD），由酵母取样、葡萄糖、酵母膏（或酵母提取物）、Casein胨、氯化钾、磷酸盐和缺氧水等八种基本成分组成。
2.前处理
在发酵前将巴斯德毕赤酵母菌种在YPD平板上,37℃下孵育过夜,然后移植到YPD液体培养基中。在37℃下培养到对数生长期，使菌密度达到10^6CFU/mL左右。
3.发酵过程
发酵过程需要根据实验设计的条件进行分批处理。具体分批条件可根据实验需求来确定。在10L发酵罐中，首先加入YPD培养基，接着加入适当的氮源，如面粉和酵母粉，混合均匀后进行灭菌。
当培养基升温到发酵温度后，加入酵母菌株，在发酵过程中，控制温度、氧气气体流量、药物诱导等因素,进行细胞生长和菌液发酵。每24小时取一份菌液测定酶活力，记录其变化情况。
三、分批发酵工艺的优缺点
分批发酵工艺是传统的人工控制方式，受制于人的主观意志和生理极限，具有时间长、效率低等缺点。但它也有其优点，比较适合小型实验室、新产品开发和为后续实验提供较优操作参数的学习和调整。同时，通过分析不同时间点的结果，可以评估各发酵阶段的优劣与进一步提高酶的产量。因此，分批发酵工艺还是有其存在和应用价值。
四、结语
本文对巴斯德毕赤酵母表达人溶菌酶的分批发酵工艺进行研究，得出了分批发酵工艺的优缺点，为后续研究和实验提供了指导并提供实践经验。在后续的研究中，可以结合新的实验参数，改进传统的人工控制方法，以提高溶菌酶产量和酵母菌的发酵效率。同时也可以尝试其他类型的生产方式，如生物反应器等，加快实验进程和提升产量，进一步应用于药物、食品和生物技术领域。