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唾液酸化人乳寡糖的分离及串联质谱结构序列分析 唾液酸化人乳寡糖的分离及串联质谱结构序列分析 摘要: 人乳寡糖是母乳中一类重要的胎脑营养素,其中唾液酸化的乳寡糖是最主要的成分之一。本研究旨在分离并鉴定唾液酸化的人乳寡糖的结构,并通过串联质谱对其结构序列进行分析。通过酶法从乳糖中提取人乳寡糖,经过离子交换层析和凝胶过滤层析实现了人乳寡糖的分离纯化。然后利用串联质谱技术(LC-MS/MS)对分离得到的人乳寡糖进行鉴定和结构序列分析。结果显示,人乳寡糖中存在多种唾液酸化的结构,其中以3'-唾液酸化和6'-唾液酸化的乳寡糖为主要成分。该研究为深入了解唾液酸化人乳寡糖的结构和功能提供了重要的基础。 关键词:唾液酸化、人乳寡糖、分离、串联质谱、结构序列分析 引言: 人乳寡糖是母乳中的一类特殊的寡糖,主要由乳糖在乳腺中经过酶的作用生成。人乳寡糖具有多种生理功能,包括促进有益菌群生长、阻碍致病菌黏附、增强免疫功能等。其中,唾液酸化的人乳寡糖是其中最重要的成分之一。唾液酸化的乳寡糖在母乳中占据了很大的比例,并且在人体内有重要的功能。因此,了解唾液酸化人乳寡糖的结构和功能对于母乳营养研究和乳糖利用率的提高具有重要意义。 方法: 1.提取纯化人乳寡糖:将乳糖溶液经过酶法处理得到人乳寡糖溶液,然后利用离子交换层析法进行初步分离,通过梯度洗脱得到纯化的人乳寡糖。 2.串联质谱鉴定和结构序列分析:将分离得到的人乳寡糖进行串联质谱分析,并通过质谱图谱分析鉴定其组成和结构序列。 结果: 经过离子交换层析和凝胶过滤层析,成功从乳糖中分离并纯化得到了人乳寡糖样品。通过LC-MS/MS技术进行质谱分析,确定了人乳寡糖中唾液酸化的结构。分析结果显示,人乳寡糖中存在多种唾液酸化的结构,主要包括3'-唾液酸化和6'-唾液酸化的乳寡糖。由于唾液酸的连接方式的不同,这两类乳寡糖在质谱图谱中有明显的特征峰和碎裂规律。 讨论: 唾液酸化人乳寡糖在母乳中的含量很高,并且在婴儿的生长发育和免疫功能发育中起到重要的作用。根据本研究的结果,可以推测唾液酸化的乳寡糖对于维持肠道菌群平衡和阻碍致病菌黏附具有重要的作用。此外,由于唾液酸在不同位置的连接方式不同,可能会对乳寡糖的功能产生影响。进一步的研究可以探究不同唾液酸化结构的乳寡糖的生理功能差异。 结论: 本研究成功分离并纯化了唾液酸化人乳寡糖,并通过串联质谱分析确定了其结构序列。结果显示人乳寡糖中存在多种唾液酸化结构,其中以3'-唾液酸化和6'-唾液酸化的乳寡糖为主要成分。本研究为进一步深入研究唾液酸化人乳寡糖的结构和功能提供了重要的基础,并为母乳营养研究和婴幼儿配方乳粉的开发提供了理论依据。 参考文献: 1.RudloffS,etal.Urinaryexcretionoflactoseandoligosaccharidesinpreterminfantsfedhumanmilkorinfantformula.ActaPaediatr,1996. 2.BodeL.Humanmilkoligosaccharides:prebioticsandbeyond.NutrRev,2009. 3.KunzC,etal.Oligosaccharidesinhumanmilk:structural,functional,andmetabolicaspects.AnnuRevNutr,2000.