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二步酶解法制备鱼鳞明胶抗氧化肽及其抗氧化活性研究 标题:二步酶解法制备鱼鳞明胶抗氧化肽及其抗氧化活性研究 摘要: 近年来,抗氧化肽作为一种重要的生理活性物质受到了广泛的关注。本研究以鱼鳞明胶为原料,采用二步酶解法制备鱼鳞明胶抗氧化肽,并研究了其抗氧化活性。结果表明,二步酶解法可高效地制备出鱼鳞明胶抗氧化肽,并且所制备的抗氧化肽具有优异的抗氧化活性。这些结果为鱼鳞明胶抗氧化肽的开发和利用提供了理论和实验依据。 关键词:鱼鳞明胶;抗氧化肽;二步酶解法;抗氧化活性 引言: 氧化应激是一种不可避免的生理现象,过量的自由基可以导致脂肪氧化、蛋白质氧化以及DNA损伤等。长期以来,抗氧化剂被广泛应用于食品、医药和化妆品等领域,以抵抗自由基的侵害。然而,常规抗氧化剂存在一些副作用和安全问题,因此对于天然来源的抗氧化物质的研究变得非常重要。 鱼鳞明胶作为一种天然的抗氧化剂,富含多肽和氨基酸,具有良好的生物活性和抗氧化性能。近年来,将鱼鳞明胶制备成抗氧化肽已成为研究的热点。本研究旨在通过二步酶解法制备鱼鳞明胶抗氧化肽,并进一步研究其抗氧化活性。 材料与方法: 1.材料: 本研究使用新鲜鱼鳞作为原料,将鱼鳞水洗净并去除鱼鳞上部的鱼肉组织。 本实验使用的酶包括胃蛋白酶和胰蛋白酶,以促进鱼鳞明胶的酶解和释放抗氧化肽。 2.方法: 1)鱼鳞的预处理:将选取的新鲜鱼鳞在去除鱼肉组织后,用去离子水洗净,并剪成小块备用。 2)第一步酶解:将预处理后的鱼鳞放入含有胃蛋白酶的缓冲液中,进行温和的酶解,以释放鱼鳞明胶。 3)第二步酶解:将第一步酶解所得的鱼鳞明胶转移到含有胰蛋白酶的缓冲液中进行进一步酶解。 4)酶解液的离心:将经过第二步酶解的酶解液进行离心,以得到鱼鳞明胶抗氧化肽。 5)抗氧化活性测定:采用多种常见的抗氧化活性测定方法,如DPPH自由基清除能力、超氧阴离子自由基清除能力等,评估鱼鳞明胶抗氧化肽的抗氧化活性。 结果与讨论: 本研究成功地通过二步酶解法制备了鱼鳞明胶抗氧化肽,并对其抗氧化活性进行了评估。实验结果表明,经过酶解的鱼鳞明胶具有优异的抗氧化活性,能有效清除DPPH自由基并抑制超氧阴离子自由基的产生。这表明鱼鳞明胶抗氧化肽能够作为有效的天然抗氧化剂。 结论: 通过对鱼鳞明胶的二步酶解法制备抗氧化肽的研究,本研究证明了二步酶解法制备鱼鳞明胶抗氧化肽的可行性,并评估了其抗氧化活性。这为鱼鳞明胶抗氧化肽的开发和利用提供了理论和实验依据,同时也为进一步研究抗氧化肽在食品和医药领域的应用打下了基础。 参考文献: [1]YuanT,MaH、QiuY,etal.PreparationandAntioxidativePeptidinVitrofromCollagenofSeabass(Lateolabraxjaponicus)Skin[J].AgricSciChina,2008,7:437-442. [2]HungYL,LeeCH,LinYC,etal.OptimizationofSmallPeptideProductionfromPearlOysterHydrolysatebyBacillusLicheniformisSJ1-1EandAntioxidativeActivity[J].ProcessBiochemistry,2010,45:1981-1988. [3]ChenX,NieW,ZengX,etal.SeparationandPurificationofAntioxidantPeptidesfromGoatMilkCaseinHydrolysatesUsingHigh-SpeedCounter-CurrentChromatographyCoupledwitha1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl-HighPerformanceLiquidChromatography-DiodeArrayDetectionMethod[J].FoodChemistry,2016,210:150-157.