纯培养与显微技术演示文稿.ppt

纯培养与显微技术演示文稿（优选）纯培养与显微技术微生物个体：小培养物显微技术是微生物研究的另一项重要技术一、微生物的分离和纯培养试管、烧瓶、培养皿等常用器皿
灭菌方法有：高压蒸汽灭菌、高温干热、煮沸接种针或接种环分离或将微生物从一个培养器皿转
接到另一个，无菌操作。火焰旁边、超净台或无菌室
进行。
接种环采用迅速加热和冷却的镍铬合金制备
液体培养物用无菌移液管或移液器一、微生物的分离和纯培养用固体培养基分离纯培养

一、微生物的分离和纯培养一、微生物的分离和纯培养同一细菌在不同的培养平板上形成不同的特征菌落克隆（clone)：一个单细胞繁殖形成的菌落，即一个纯种细胞群或克隆。
固体培养基：琼脂或其他凝胶物质固化的培养基。
平板：即培养平板（cultureplate)。融化的固体
培养基倒入无菌平皿冷却凝固后即为平板，
用于分离、培养微生物。
稀释平板法（pourplatemethod)
将细菌或其他微生物无菌水梯度稀释，取少量与冷却至50℃固体培养基混合，摇匀，倒入培养皿，凝固，倒置培养24小时，就会出现菌落。

一、微生物的分离和纯培养涂布平板法（spreadplatemethod)
稀释平板法因为细菌与50℃培养基混合导致某些热敏感菌死亡，及好氧菌埋在培养基中缺乏氧气影响生长，所以更常用涂布平板法。一、微生物的分离和纯培养平板划线分离法（streakplatemethod）
接种环沾取少许微生物，在无菌平板扇形、平行等划线，随划线次数增加而分散开，得到单菌落。
第二十页，共五十六页。稀释摇管法(dilutionshakeculturemethod）
厌氧微生物可用此法进行纯培养分离。
操作：盛培养基试管加热融化，冷却至50℃，待分离材料用这些试管梯度稀释，摇匀，冷凝，石蜡封口厌氧微生物分离装置：液体培养基分离纯培养：显微分离法直接分离单细胞或单个个体培养获得纯培养对某微生物生长需要了解后，设计适合其生长繁殖的培
养基，抑制其他菌生长，即使该微生物在混杂群体中很
少也可分离。
选择培养基直接分离
一、微生物的分离和纯培养根据微生物的特殊要求，从自然界分离出特定已知微生物种类一、微生物的分离和纯培养一、微生物的分离和纯培养一、微生物的分离和纯培养斜面：可保存数周至数年，可用石蜡或橡皮塞封口，低
温延长保存时间
液体：菌苔制成菌悬液，低温（悬液保藏法）
缺点：繁琐、易污染、变异丧生原有特性一、微生物的分离和纯培养一、微生物的分离和纯培养二、显微镜和显微技术二、显微镜和显微技术二、显微镜和显微技术二、显微镜和显微技术N：玻片与物镜间介质的折射率二、显微镜和显微技术二、显微镜和显微技术暗视野显微镜暗视野显微镜相差显微镜相差显微镜荧光显微镜二、显微镜和显微技术二、显微镜和显微技术大肠杆菌
透射电子显微镜图扫描电子显微镜（SEM）扫描隧道显微镜（STM）厨房抹布上的细菌和霉菌显微样品制备二、显微镜和显微技术二、显微镜和显微技术活体观察难看到微生物的细致形态和结构，需染色观察。
染色前需要对样品固定，目的：杀死细菌使菌体黏附在
玻片上；还可增加对染料的亲和力。
常用：酒精火焰加热和化学固定两种方法