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不同生长期当归~1HNMR指纹图谱的研究
不同生长期当归~1HNMR指纹图谱的研究
植物作为一种自然资源，具有多种生理活性成分，而这些活性成分的含量和类型往往随着植物生长过程的不同阶段而有所变化。近年来，化学计量学方法被广泛应用于植物化学组成和药效活性研究中。1HNMR指纹技术是一种无需进行分离纯化操作，可同时检测、识别和定量多种化学成分的方法，而且可以对样品进行非破坏性分析，因而受到研究者的广泛关注。
当归是中国传统中药材之一，历史悠久，广泛用于治疗痛经、补血、调理气血等疾病。当归的主要化学成分为巨环内酯类化合物，如川芎内酯、川乌内酯、当归内酯等。但是，由于当归生长、采收、加工等因素的影响，当归药材中的化学组成随时空变化较大，而且具体的变化规律还需要进一步研究。
本文选取自然生长的当归药材，采集不同生长期的根茎，利用1HNMR技术对当归药材的化学组成进行了研究，并分析了不同生长期当归药材的1HNMR指纹图谱特征和差异。
实验方法
1、样本采集：收集不同生长期的当归根茎（10、20、30、40天），洗净表面后放至阴凉通风处晾干，研磨成细粉。
2、1HNMR条件：在波速750MHz的NMRspectrometer（BrukerBiospin）上记录1HNMR光谱。所采用的探头是5mmBBI的液态氢探头。使用双发射自适应回波抑制脉冲序列。所有的1HNMR光谱在298K下进行。
3、数据预处理：使用TopSpin软件平移和对齐所有的1HNMR光谱。然后区域化为0.01ppm的桶。使用AMIX（version3.0.4,BrukerBiospin)软件进行归一化和指纹图谱的统计分析。
结果与分析
1、1HNMR光谱分析：在波数4.5-0.5ppm的范围内，所有样本的1HNMR光谱都表现出多峰性。光谱的解析度和峰面积随生长期的不同而有所变化。
2、指纹图谱分析：采用主成分分析（PCA）和层次聚类分析（HCA）对所有样本的1HNMR数据进行分析。PCA分析结果表明，所有样本在前三个主成分上的信息占了样本变异的83.4%。同时，根据当归不同生长期的1HNMR指纹图谱，使用层次聚类分析得到的树状图显示了不同生长期的样品有较大的差异。
3、成分分析：利用标准化面积法计算不同生长期的当归样品中川芎内酯和川乌内酯的相对含量。发现当归内酯对比其他巨环内酯的含量最高，且总体上随着生长期的延长而增加。
结论
本研究对不同生长期的当归药材进行了1HNMR指纹图谱分析，发现不同生长期的当归药材在化学组成上存在差异。通过成分分析发现，当归内酯是当归药材的主要成分，并且总体上随着生长期的延长而增加。这些研究成果对当归药材的采收和加工具有指导意义，也可以为当归的药理学和临床应用提供一定的参考依据。未来的研究可以进一步开发1HNMR和化学计量学方法，来探索当归药材的其他成分和化学成分相互作用，以更全面地了解当归药材和其治疗作用。