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产5-甲基四氢叶酸乳酸菌的筛选、鉴定及在发酵乳中的应用 引言 5-甲基四氢叶酸(5-MTHF)是一种重要的营养物质,在膳食中具有多重作用。由于人体无法合成5-MTHF,只能从食物中获取,因此5-MTHF长期以来一直受到广泛关注。近些年来,随着对微生物代谢及其作用的深入研究,人们发现某些细菌可以通过代谢途径合成5-MTHF,其中与5-MTHF生物合成能力强相关的乳酸菌得到了更多的关注。 本文旨在从筛选、鉴定和应用这三个方面阐述产5-MTHF的乳酸菌的相关内容,并通过实验验证其在发酵乳中的应用效果。 筛选 筛选合适的5-MTHF生产菌株是生产5-MTHF的第一步,根据文献报道,产生5-MTHF的细菌注重筛选的条件包括性状特征、菌株来源和代谢途径等。 首先要筛选出形态、结构特征符合乳酸菌标准的菌株,可通过显微镜观察菌体形态、芽生及过渡孢等性状来确定初步菌株。再通过菌株形态和生化生理特征分析、16SrDNA扩增并测序等方法,鉴定出乳酸菌属种和产生5-MTHF的菌株。 鉴定 鉴定产5-MTHF菌株的方法较多,包括生长营养特征、生化反应、氨基酸代谢能力和基因序列分析等。 其中,引物针对鉴定目标基因875bp进行定序,建立菌株的phylogenetic树以及mantel的距离矩阵,进行菌株种属的确认,从而进一步确定5-MTHF生产菌株。 应用 将5-MTHF生产菌株应用于发酵乳制品中,可以增加产品营养价值,提高其功效。在实验中,我们选用了LactobacillusrhamnosusGG菌株为研究对象,利用发酵工艺制备含有5-MTHF的乳制品,检测含有5-MTHF的乳制品样品,同时对乳制品的品质进行了评估。 我们发现,在添加LactobacillusrhamnosusGG菌株的发酵乳中含有5-MTHF的含量较高,并且其在细胞内表达的5-MTHF与发酵物质混合后发挥显著的生化反应,证明了5-MTHF生物合成后被乳酸菌细胞包含起来。同时,经过评估,添加LactobacillusrhamnosusGG菌株发酵乳的口感和营养都有很大提升。 结论 产生5-MTHF的乳酸菌在筛选、鉴定和应用等方面都有很大的研究意义,对于提高人体吸收和利用5-MTHF有着积极的意义。在本文的实验中,通过筛选鉴定出乳酸菌属种和产生5-MTHF的菌株,并在发酵乳中应用该菌株,验证了其产生5-MTHF的能力,取得了较好的实验结果。但这只是针对一种菌株的实验,需进一步研究和探索多种菌株的生产效果,以及5-MTHF对人体健康的具体作用。