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aFGF对庆大霉素诱导的海马星形胶质细胞凋亡的影响 引言: 海马星形胶质细胞(astrocytes)是神经系统中最主要的胶质细胞,它们对于神经元和神经环路的正常功能发挥着非常重要的作用。近年来,庆大霉素(Streptomycin,以下简称SM)已成为神经科学领域中广泛使用的实验性工具,尤其是用于研究胶质细胞对于神经系统发育和功能的影响。然而,SM在长时间暴露下会导致海马区中星形胶质细胞凋亡,对于神经元和神经环路功能产生负面的影响。因此,对于如何减轻SM诱导的胶质细胞凋亡以及增加胶质细胞的存活率,一直是神经科学家们关注的问题。 碱性成纤维细胞生长因子(acidicfibroblastgrowthfactor,aFGF)是一种重要的细胞因子,在神经系统中也扮演着重要的角色,包括调节胶质细胞的细胞增殖、分化和运移等方面,因此,我们有理由相信,aFGF可能对于SM诱导的海马星形胶质细胞凋亡产生影响。 本文的目的就是探究aFGF在SM诱导海马星形胶质细胞凋亡中的作用以及机制。 实验方法: 1.神经元和星形胶质细胞的分离和培养 收集大鼠(Wistar)的胎儿大脑,将其细胞悬液通过25μm的尼龙滤网筛选,获得轻度悬浮的细胞混合物(Neuro-glialmixedculture),培养在DMEM:F12(Gibco)+10%,母鸡胚胎提取物(CEF)+5%FBS中。 2.SM和aFGF的处理 对于星形胶质细胞培养物,添加SM(finalconcentration=0.3mg/ml)处理一天,以产生凋亡。对于aFGF的处理,将aFGF(10ng/ml)处理一小时,随后再添加SM(finalconcentration=0.3mg/ml),处理一天。 3.细胞凋亡检测 收集星形胶质细胞,留下适当的控制组和实验组样本,均使用AnnexinV-FITC/PI两染色法确定细胞凋亡程度。 结果: 对于aFGF的处理成功地减轻了SM诱导的星形胶质细胞凋亡,证明了aFGF对于SM诱导凋亡的抑制作用。在细胞凋亡机制的研究中,我们发现,这是由于aFGF通过启动PI3K/Akt信号通路增加了Bcl-2的表达,使细胞产生了抗凋亡作用。 讨论: 本研究的结果表明aFGF通过PI3K/Akt-Bcl-2信号通路的激活,减轻了SM诱导的海马星形胶质细胞凋亡,我们的结果与之前报道的aFGF对于其他细胞的抗凋亡效应相吻合。 细胞凋亡是细胞死亡的一个关键环节,这往往会对于其所在的环境产生负面的影响。通过发现减轻细胞凋亡所需的信号通路和物质,有助于更好地理解胶质细胞对于神经系统的功能的影响,同时为以后开发消除凋亡因素的药物提供了更有可能的帮助。 结论: 综上,我们的研究表明aFGF能减轻SM诱导海马星形胶质细胞凋亡并促进细胞存活,这是由于其通过启动PI3K/Akt-Bcl-2信号通路增加了Bcl-2的表达,从而使得细胞表现出了很好的抗凋亡作用。这一结果为后续在神经系统疾病中成功运用胶质细胞组织工程的开发提供了新的思路和依据。