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微波辅助提取牡丹籽粕多糖工艺优化及其体外抗氧化活性 摘要 本研究旨在优化微波辅助提取牡丹籽粕多糖工艺,并评估其体外抗氧化活性。通过正交试验法优化微波功率、提取时间和比例为40:2ml/g的水提液浓度,得到最佳提取工艺条件:微波功率600W、提取时间4min,提取液浓度为0.5g/ml。此外,确定牡丹籽粕多糖体外抗氧化实验方法,结果表明其清除DPPH自由基、羟自由基和ABTS自由基的能力均较强,具有良好的体外抗氧化活性。因此,本研究为牡丹籽粕多糖的开发利用提供了参考和基础。 关键词:微波辅助提取、牡丹籽粕多糖、正交试验、抗氧化活性 Abstract Thepurposeofthisstudywastooptimizethemicrowave-assistedextractionprocessofpeonyseedcakepolysaccharidesandevaluateitsinvitroantioxidantactivity.Theorthogonalexperimentaldesignmethodwasusedtooptimizethemicrowavepower,extractiontimeandtheconcentrationofwaterextractwitharatioof40:2ml/g.Theoptimizedextractionprocessconditionswereobtainedwiththemicrowavepowerof600W,extractiontimeof4minandextractconcentrationof0.5g/ml.Inaddition,themethodforinvitroantioxidantactivityofpeonyseedcakepolysaccharideswasdetermined.TheresultsshowedthattheabilitytoremoveDPPHfreeradicals,hydroxylradicalsandABTSfreeradicalsofpeonyseedcakepolysaccharideswasstrong,andhadgoodinvitroantioxidantactivity.Therefore,thisstudyprovidesareferenceandbasisforthedevelopmentandutilizationofpeonyseedcakepolysaccharides. Keywords:Microwave-assistedextraction,Peonyseedcakepolysaccharides,Orthogonalexperimental,Antioxidantactivity 引言 现代医学研究表明,自由基和氧化应激是引起机体老化和多种疾病的重要原因之一。抗氧化剂可清除自由基、减少氧化应激反应,从而起到保护机体的作用。多糖具有多种生物学活性,如免疫调节、抗氧化、抗肿瘤等。牡丹籽粕富含多糖,具有多种生物学活性,广泛应用于保健品和药物领域。 传统多糖提取工艺繁琐、耗时长,而微波辅助提取是一种快速、高效的多糖提取方法。本研究旨在通过正交试验法优化微波辅助提取牡丹籽粕多糖工艺,评估其体外抗氧化活性,为牡丹籽粕的开发利用提供参考和基础。 材料与方法 材料 牡丹籽粕,何氏鼠李科植物牡丹(PaeonialactifloraPall.)的种子经压榨后得到的残渣。 方法 微波辅助提取工艺优化 以牡丹籽粕为原料,采用正交试验法优化微波辅助提取牡丹籽粕多糖工艺,设计三因素四水平正交试验方案。三因素包括微波功率、提取时间和浓度,各水平设置如表1所示。 表1三因素四水平正交试验方案 试验因素水平1水平2水平3水平4 微波功率(W)400500600700 提取时间(min)2345 浓度(g/ml)0.30.40.50.6 浸提工艺 将牡丹籽粕粉末(5g)加入50ml含不同浓度的蒸馏水(0.3g/ml、0.4g/ml、0.5g/ml、0.6g/ml)的烧杯中,用减压过滤器过滤,滤液蒸发干燥。分别称取不同浓度的干粉,用称量纸准确称取干粉的质量(W),并加入50ml热水中,使用不同条件下微波设备进行提取。待提取液降温后,用0.45μm的微孔膜滤器过滤,滤液备用。 多糖含量测定 采用硫酸-苯酚法测定多糖含量。取0.1ml多糖提取液加入10ml蒸馏水中,加入5ml1%苯酚溶液,加热至80°C后慢慢加入5ml浓硫酸,混合,冷却至室温后放到宽口烧杯中,加入20ml蒸馏水摇匀,并置于水浴中加热20min。待溶液冷却至室温后,读取吸收值A450。 抗氧化实验 DPPH自由基清除实验 将不同浓度的多糖溶液(0.1ml)和DPPH(0.1mM)混合,