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GB/T8314-2002 前言 本标准是对GB/T8314-1987《茶游离氨基酸总量测定》的修订。 本标准修订主要是按照GB/T1.1-1993《标准化工作导则第1单元:标准的起草与表述规则 第1部分:标准编写的基本规定》的要求,对GB/T8314-1987在格式和文字上作了一些修改,具体技 术内容没有变动。 本标准自实施之日起,同时代替GB/T8314-19870 本标准由中华全国供销合作总社提出。 本标准由中华全国供销合作总社杭州茶叶研究院归口。 本标准起草单位:中华全国供销合作总社杭州茶叶研究院。 本标准主要起草人:周卫龙、孙安华、钟萝。 本标准由中华全国供销合作总社杭州茶叶研究院负责解释。 中华人民共和国国家标准 GB/f8314-2002 茶游离氨基酸总量测定 代替GB/T83141987 Tea一Determinationoffreeaminoacidscontent 1范围 本标准规定了对茶叶中游离氨基酸总量测定的原理、仪器和用具、试剂和溶液、操作方法及结果计 算方法 本标准适用于茶叶中游离氨基酸总量的测定。 2引用标准 下列标准所包含的条文,通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时,所示版本均 为有效。所有标准都会被修订,使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。 GB/T8302-2002茶取样 GB/T8303-2002茶磨碎试样的制备及其干物质含量测定 GB/T8312-2002茶咖啡碱测定 GB/T8313-2002茶茶多酚测定 3定义 本标准采用下列定义。 游离氨基酸freeaminoacids 茶叶水浸出物中呈游离状态存在的具有。一氨基的有机酸。 4原理 a-氨基酸在pH8.。的条件下与ip三酮共热,形成紫色络合物,用分光光度法在特定的波长下测定 其含量。 5仪器和用具 实验室常规仪器及下列各项 分析天平感量。.001go ;.;分光光度仪。 6试剂和溶液 所用试剂应为分析纯(AR),水为蒸馏水。 6门pH8.0磷酸盐缓冲液:按GB/T8313---2002中6.2的规定,配制1/15mol/I磷酸氢二钠(6.2.1) 和1/15mol/I磷酸二氢钾(6.2.2)溶液。然后取1/15mol/I_的磷酸氢二钠溶液95ml_和1/15mol/I 磷酸二氢钾溶液5ml,混匀。 中华人民共和国国家质f监督检验检疫总局2002-06-17批准200?一12-01TO GB/'r8314-2002 6.22%茹三酮溶液:称取水合茹二酮(纯度不低于9900)2g,加50mL水和80mg氯化亚锡(SnCl· 2H,0)搅拌均匀。分次加少量水溶解,放在暗处,静置一昼夜,过滤后加水定容至100ml- 茶氨酸或谷氨酸标准液:称取100mg茶氨酸或谷氨酸(纯度不低于99)溶于100mL水中,作为 64.34.准确吸取5ml母液,加水定容至50mL作为工作液(1ml含茶氨酸或谷氨酸。1m妇 了操作方法 7.1取样 按G1到T8302的规定 7.2试样制备 按照GB/I8303的规定。 7.3测定步骤 7.11试液的制备 按GB/T8312-2002中11.1的规定。 7.3.2测定 准确吸取试液(7.3.1)1mL,注人25m工的容量瓶中,加。.5m工pH8.0磷酸盐缓冲液(6.1)和 0.5ml,2环茹三酮溶液(6.2),在沸水浴中加热15min。待冷却后加水定容至25mL。放置10min后, 用5mm比色杯,在570nm处,以试剂空白溶液作参比,测定吸光度(A), 7.13氨基酸标准曲线的制作 分别吸取。.0,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0mL氨基酸工作液(6.3)于一组25mL容量瓶中,各加水 4ml,,pH8.0磷酸盐缓冲液(6.1)0.5ml和2%苟三酮溶液(6.2)0.5ml,,在沸水浴中加热15min,冷 却后加水定容至25ml,按7.3.2的操作测定吸光度(A)。将测得的吸光度与对应的茶氨酸或谷氨酸浓 度绘制标准曲线 8结果计算 8.1计算方法 茶叶中游离氨基酸含量以干态质量分数表示,按式(1)计算 几 几一 游离氨基酸总量(以茶氨酸或谷氨酸计)(%)=火100······。。。(1) M}Xm 式中:L,—试液总量,m1_, L一测定用试液量,mL; M-—试样量,川 C 一一根据7.3.2测定的吸光度从标准曲线上查得的茶氨酸或谷氨酸的毫克数 胡一一试样十物质含量,%。 如果符合重复性(8.2)的要求,则取两次测定的算术平均值作为结果,结果保留小数点后一位。 8.2重复性 同一样品的两次测定值之差,每100g试样不得超过。1go