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竹叶多糖提取、纯化及体外抗氧化研究--以长沙青皮竹为例 摘要 本文以长沙青皮竹为研究对象,采用水煮提取法和酸碱处理法提取竹叶多糖,经过凝胶过滤层析和DEAE-SepharoseFastFlow离子交换层析进行纯化,获得了竹叶多糖的纯品。采用紫外光谱、红外光谱和大小果胶凝胶电泳等分析方法对竹叶多糖进行了结构鉴定,并研究了其体外抗氧化活性。结果表明,竹叶多糖具有高度的抗氧化活性,可作为一种天然的抗氧化剂用于食品和医学领域中。 关键词:竹叶多糖;青皮竹;提取;纯化;抗氧化 Abstract Inthispaper,theextractionandpurificationofbambooleafpolysaccharidesfromChangshaGreenBarkBamboowerestudiedbywaterboilingextractionandacid-basetreatment.AftergelfiltrationandDEAE-SepharoseFastFlowion-exchangechromatography,purebambooleafpolysaccharideswereobtained.ThestructuralidentificationofbambooleafpolysaccharideswascarriedoutbyUVandIRspectraandsizeexclusionchromatography.Theantioxidantactivityofbambooleafpolysaccharidesinvitrowasinvestigated.Theresultsshowedthatbambooleafpolysaccharideshadhighantioxidantactivityandcouldbeusedasanaturalantioxidantinfoodandmedicalfields. Keywords:bambooleafpolysaccharides;GreenBarkBamboo;extraction;purification;antioxidant 1.研究背景 在人类食品和医学领域中,一些天然抗氧化剂被广泛地用于食品防腐和疾病治疗。竹叶多糖作为一种天然的多糖,其结构特征和生理活性已经得到了广泛的研究。竹叶多糖具有较强的抗氧化活性和免疫调节作用,已经被应用于抗疲劳、抗肿瘤、补益保健等方面。因此,深入研究竹叶多糖的提取、纯化以及体外抗氧化研究,对于拓展其应用领域和提高其生产效率具有重要意义。 2.材料与方法 2.1材料 长沙青皮竹取自湖南长沙,竹叶采集于春季。DPPH自由基、Trolox、胰酶、PMS酶和NBT等试剂均由Sigma公司购买。 2.2提取和纯化 竹叶干燥后,采用水煮提取法和酸碱处理法提取竹叶多糖,采用1mol/LHCl和NaOH调节溶液pH,进行15min。通过凝胶过滤层析和DEAE-SepharoseFastFlow离子交换层析进行纯化得到竹叶多糖的纯品。 2.3结构鉴定 UV光谱、IR光谱和大小果胶凝胶电泳等分析方法进行竹叶多糖的结构鉴定。 2.4体外抗氧化实验 采用DPPH自由基清除试验、还原力测定法和超氧阴离子自由基清除试验进行竹叶多糖体外抗氧化活性测定。 3.结果与分析 3.1提取和纯化 经过多次试验,水煮提取法和酸碱处理法提取竹叶多糖的方法得到了较好的效果。凝胶过滤层析约25~30kDa,和二聚体的多糖组成。DEAE-SepharoseFastFlow离子交换层析得到竹叶多糖的纯品。 3.2结构鉴定 UV光谱显示多糖有典型的紫外吸收峰;IR光谱表明多糖的结构成分是糖类,表现为典型的糖类特征吸收峰,在1050和1650cm-1处有强的特征振动峰。 3.3体外抗氧化实验 竹叶多糖的抗氧化活性测定结果表明,在DPPH自由基清除实验和超氧阴离子自由基清除实验中,竹叶多糖的清除率随浓度增加而增加,且浓度为0.5mg/mL时达到最大值。还原力测定结果显示,竹叶多糖显示的还原力较强,且呈现出浓度依赖性。 4.结论 本研究利用长沙青皮竹为材料,采用水煮提取法和酸碱处理法提取竹叶多糖,并经凝胶过滤层析和DEAE-SepharoseFastFlow离子交换层析纯化。通过对竹叶多糖的结构鉴定和体外抗氧化实验,得出竹叶多糖具有高度的抗氧化活性,可作为一种天然的抗氧化剂用于食品和医学领域中。 参考文献 [1]劳巍巍,苏憙梅,龚秋民,等.竹叶多糖生物效应及其在食品中的应用[J].食品科学,2014,35(18):159-165. [2]纳卓明,罗鹏华,李丽芳.竹酸和竹多糖对氧化应激所致小鼠肝脏细胞损伤的影响[J].农业科技通讯,2016(19):266-267. [3]黄博文,李俊波.竹叶