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体外培养DC-CIK细胞杀伤白血病细胞实验研究
摘要
目的：研究体外培养的DC-CIK细胞对白血病细胞的杀伤作用及其作用机制。
方法：建立白血病细胞株K562和体外培养的DC-CIK细胞，并采用MTT法检测DC-CIK细胞对K562细胞的杀伤作用。同时，使用流式细胞术分析DC-CIK细胞对K562细胞的作用机制，并利用WesternBlot法检测相关蛋白的表达。
结果：DC-CIK细胞可以显著地杀伤K562细胞，且杀伤作用与细胞浓度呈正相关关系。同时，DC-CIK细胞可以增强CD3、CD8的表达，并显著减少PD-1、CD4、CD178和CD275的表达。进一步的研究表明，这种作用可能与PI3K/Akt信号通路的抑制以及NF-κB信号通路的激活有关。
结论：体外培养的DC-CIK细胞可以显著地杀伤白血病细胞，作用机制可能与PI3K/Akt信号通路的抑制和NF-κB信号通路的激活有关。这些结果为DC-CIK细胞在临床上的应用提供了理论基础。
关键词：DC-CIK细胞，白血病，杀伤作用，PI3K/Akt信号通路，NF-κB信号通路
Abstract
Objective:Toinvestigatetheanti-leukemiaeffectofDC-CIKcellsthatwereculturedinvitroanditsmechanisms.
Methods:LeukemiacellstrainK562andDC-CIKcellsthatwereculturedinvitrowereestablished.Then,theMTTassaywasusedtodetecttheanti-leukemiaeffectofDC-CIKcellsagainstK562cells.Meanwhile,flowcytometrywasusedtoanalyzethemechanismsofDC-CIKcellsagainstK562cells,andWesternBlotwasusedtodetecttheexpressionofrelatedproteins.
Results:DC-CIKcellscansignificantlykillK562cells,anditseffectwaspositivelycorrelatedwiththeconcentration.Meanwhile,DC-CIKcellscanenhancetheexpressionofCD3andCD8,andsignificantlyreducetheexpressionofPD-1,CD4,CD178andCD275.FurtherstudiesshowedthatthiseffectmayberelatedtotheinhibitionofthePI3K/AktsignalingpathwayandtheactivationoftheNF-κBsignalingpathway.
Conclusion:DC-CIKcellsthatwereculturedinvitrocansignificantlykillleukemiacells,anditsmechanismmayberelatedtotheinhibitionofthePI3K/AktsignalingpathwayandtheactivationoftheNF-κBsignalingpathway.TheseresultsprovideatheoreticalbasisfortheclinicalapplicationofDC-CIKcells.
Keywords:DC-CIKcells,leukemia,anti-leukemiaeffect,PI3K/Aktsignalingpathway,NF-κBsignalingpathway
导论
白血病是一种常见且致命的血液疾病，其发病率和死亡率在全球范围内都居高不下。传统的白血病治疗方法包括放疗、化疗和骨髓移植，但这些方法的效果并不理想，且副作用较大。因此，探索一种新的、有效的白血病治疗方法具有重要意义。
DC-CIK细胞是由外周血中诱导型DC和CIK细胞共同培养后得到的一种具有免疫活性的细胞群体。DC-CIK细胞能够通过增强机体的免疫功能，提高机体对癌细胞的杀伤作用，从而实现癌症的治疗。近年来，越来越多的研究表明，DC-CIK细胞对白血病具有一定的杀伤作用，但其作用机制尚不清楚。
因此，本研究旨在探讨体外培养的DC-CIK细胞对白血病细胞的杀伤作用及其作用机制，为其临床应用提供理论基础。
材料和方法
实验材料：K562白血病细胞株，DC-CIK细胞，PBS，RPMI1640培养基，MTT，AnnexinV-FITC/PI，PI3K/Akt、NF-κB、CD