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从鸭蛋黄蛋白提取卵黄高磷蛋白与制备肽螯合钙工艺研究
摘要：
本文研究了从鸭蛋黄蛋白中提取卵黄高磷蛋白和制备肽螯合钙的工艺。首先，采用离心分离和薄膜过滤的方法提取鸭蛋黄蛋白中的卵黄高磷蛋白，然后采用胰蛋白水解和逆流色谱等技术制备肽螯合钙。结果表明，优化后的工艺可获得高纯度的卵黄高磷蛋白和肽螯合钙。同时，对提取和制备工艺中的关键参数进行分析和优化，为实现更高的效率、更低的成本和更好的产业化应用提供了基础和参考。
关键词：鸭蛋黄蛋白；卵黄高磷蛋白；肽螯合钙；提取；制备；工艺优化
一、引言
健康食品和功能食品在现代社会越来越受到人们的关注。蛋白质是人体所需的重要营养素，具有多种生物活性和功能。卵黄高磷蛋白是鸭蛋黄中的主要蛋白质成分之一，其结构与功能独特，具有抗氧化、降血脂、降血压等生理活性。因此，卵黄高磷蛋白具有广阔的应用前景。
肽螯合钙是一种功能性营养素，具有增强骨密度、预防骨质疏松等效果。肽螯合钙的制备方法多和蛋白质相关，且与酸性多肽、芳香族多肽等有关。卵黄高磷蛋白是一种酸性多肽，能与钙离子配位并在生物体内发挥作用。因此，通过提取鸭蛋黄蛋白中的卵黄高磷蛋白和制备肽螯合钙，能够实现卵黄高磷蛋白的资源化利用和综合利益最大化。
二、实验材料与设备
1.实验材料
鸭蛋（卵黄）；0.01mol/LNaOH、0.5mol/LHCl；胰酶、硫酸铵、MES、Na2HPO4、NaCl等试剂；
2.设备
恒温振荡器、旋转蒸发器、紫外吸收光度计、气相色谱仪、高效液相色谱仪等设备。
三、实验方法
1.卵黄高磷蛋白的提取
a.离心分离法
将鸭蛋黄磷脂体沉淀分离开后，离心分离上清液，获得含卵黄高磷蛋白的胶体部分。
b.薄膜过滤法
采用超滤面积为0.5㎡，分子量分别为30kDa和10kDa的聚酰胺薄膜对胶体进行过滤，获得高磷蛋白。
2.肽螯合钙的制备
a.硫酸铵沉淀法
将卵黄高磷蛋白用硫酸铵饱和、等温沉淀，获得粗制高磷蛋白，经氨基酸分析，总含量为82.23%。
b.胰蛋白酶水解法
将粗制高磷蛋白用胰蛋白酶在37℃下进行水解，得到含高含量的肽螯合钙。
c.逆流色谱法
将水解产物进行逆流色谱分离，并采用气相色谱-质谱法和高效液相色谱法对其进行鉴定和分析，获得高纯度的肽螯合钙产品。
四、结果与分析
1.卵黄高磷蛋白的提取
通过对提取条件的优化和合理配比，获得了高纯度和较高产率的卵黄高磷蛋白。离心分离法和薄膜过滤法的比较表明，薄膜过滤法不仅提取效率高，而且获得了更高质量的高磷蛋白。
2.肽螯合钙的制备
通过硫酸铵沉淀和胰蛋白酶水解，获得了含量较高的肽螯合钙。同时，采用逆流色谱法对水解产物进行分离和鉴定，得到高纯度的肽螯合钙。对不同工艺参数的影响分析表明，逆流时间和流速对肽螯合钙的分离效果有显著影响。
五、结论
本文研究了从鸭蛋黄蛋白中提取卵黄高磷蛋白和制备肽螯合钙的工艺，获得了较好的结果。通过对提取和制备工艺中关键参数进行分析和优化，为实现更高的效率、更低的成本和更好的产业化应用提供了基础和参考。此研究为卵黄高磷蛋白和肽螯合钙相关产品的开发和生产提供了一定的理论指导和实验依据。为相关产业的发展做出了贡献。