一种卵黄高磷蛋白源钙螯合肽及其肽钙螯合物与应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN112250749A(43)申请公布日2021.01.22(21)申请号202011132175.XA61P9/12(2006.01)(22)申请日2020.10.21A61P3/14(2006.01)(71)申请人天津科技大学地址300457天津市滨海新区经济技术开发区第十三大街29号(72)发明人张晓维贾琦巩婷婷司凯刘会平(74)专利代理机构北京瑞盛铭杰知识产权代理事务所(普通合伙)11617代理人栗华楠(51)Int.Cl.C07K14/465(2006.01)C07K1/107(2006.01)A23L33/165(2016.01)A61K38/17(2006.01)权利要求书1页说明书8页附图8页(54)发明名称一种卵黄高磷蛋白源钙螯合肽及其肽钙螯合物与应用(57)摘要本发明属于生物小分子活性肽领域，具体涉及一种来源于卵黄高磷蛋白的钙螯合肽及其肽钙螯合物和应用。所述钙螯合肽由九个氨基酸组成，序列为DEEENDQVK，本发明提供的钙螯合肽DEEENDQVK在制备肽钙螯合物时，具有较高的钙结合率和螯合肽钙得率，合成肽钙结合率为97.00±1.42％，螯合肽钙得率为87.76±1.91％，钙离子螯合量为151.10±3.57mg/g。本发明提供的肽钙螯合物DEEENDQVK‑Ca，消化吸收率和保留率均高于其他有机钙和CaCO3，有利于钙的吸收；有利于促进蛋制品的高值化利用、显著改善人们的缺钙现象。CN112250749ACN112250749A权利要求书1/1页1.一种来自卵黄高磷蛋白的钙螯合肽，其特征在于，所述钙螯合肽由九个氨基酸组成，序列为DEEENDQVK。2.权利要求1所述钙螯合肽的制备方法，其特征在于，采用化学固相合成法制备。3.权利要求1所述钙螯合肽在制备降血压药物、保健品、食品、化妆品、日化用品中的应用。4.权利要求1所述钙螯合肽在制备肽钙螯合物中的应用。5.一种肽钙螯合物的制备方法为，其特征在于，将权利要求1所述的钙螯合肽和钙源在水中进行螯合反应，所述螯合反应的参数设置：肽钙比为0.1～0.8g/mmol，螯合温度30～70℃，螯合时间10～90min，pH5.5～9.0。6.权利要求5所述方法制备的肽钙螯合物。7.权利要求6所述肽钙螯合物在作为钙补充剂中的应用。2CN112250749A说明书1/8页一种卵黄高磷蛋白源钙螯合肽及其肽钙螯合物与应用技术领域：[0001]本发明属于生物小分子活性肽领域，具体涉及一种来源于卵黄高磷蛋白的钙螯合肽及其肽钙螯合物和应用。背景技术：[0002]钙是人体必需的主要元素，约占体重的1.5％～2.2％。大约99％的钙以磷酸钙的形式存在于骨骼中，磷酸钙在保持骨骼强度方面发挥着关键作用。此外，钙被称为信号传递的第二信使，在维持人体正常的生理功能如神经传导、肌肉收缩和血液凝固等方面发挥着重要作用。当体内钙含量过低时，会导致低钙血症，症状包括手指和脚趾麻木、肌肉痉挛、易怒、智力受损和肌肉痉挛。[0003]目前市场上的钙补充剂主要有无机钙、有机酸钙和氨基酸钙络合物。然而，这些钙补充剂都有一些缺陷。例如,无机钙的吸收和生物利用度很低，有机钙显示低浓度的钙和使用限制，氨基酸钙复合物尚未广泛使用,因为它成本高,容易导致脂肪氧化。与氨基酸相比，小肽的吸附具有能耗低、传输速度快、载体不易饱和等优点。肽与钙形成可溶性肽—钙复合物，提高其吸附和生物利用度，成为当前研究的热点。[0004]卵黄高磷蛋白(Phosvitin,PV)是从蛋黄中提取的一种含磷蛋白。PV及其水解产物富含磷酸丝氨酸残基，具有良好的促进生物矿化功能，因此得到了广泛的研究。近年来发现了多种参与生物矿化的磷酸化蛋白，如牙本质磷蛋白、骨涎蛋白、骨桥蛋白等。这些蛋白有一些共同的特性：大多数是高磷酸化的酸性蛋白，富含谷氨酸、天冬氨酸和磷酸化的丝氨酸/苏氨酸(P-Ser/Thr)残基，具有很强的钙离子结合能力。PV是自然界磷酸化程度最高的蛋白质，能与大量钙离子结合且亲和力强，但其结合位点和作用机制尚不清楚，限制了其作为钙补充剂产品的应用。PV可以被酶解成小分子的肽，从而暴露活性中心。因此，分离制备出卵黄蛋白水解产物中的钙螯合肽，对于磷酸化蛋白调控生物矿化的基础理论研究具有重要的学术意义，能为钙补充剂开发新的蛋白源，并对禽蛋深加工领域做出重要贡献。发明内容：[0005]目前市面上的补钙产品中，钙螯合肽的蛋白源的种类有限，产品单一。本发明的目的是提供一种卵黄高磷蛋白来源的钙螯合肽，并以此制备肽钙螯合物，以丰富补钙剂种类，探索禽蛋的高值化利用和新型肽-钙产品的开发。[0006]本发明提供的技术方案之一，是一种来自卵黄高磷蛋白的钙螯合肽，所述钙螯合肽由九个氨基酸组成，序列