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HPLC法同时测定陈皮降气颗粒中橙皮苷、新橙皮苷和柚皮苷含量的可行性研究
摘要
本研究旨在探讨HPLC法同时测定陈皮降气颗粒中橙皮苷、新橙皮苷和柚皮苷含量的可行性。通过优化样品制备和色谱条件等因素，建立了一种准确、快速、重复性好的HPLC法，可同时测定陈皮降气颗粒中的三种黄酮类化合物。结果表明，在优化的色谱条件下，橙皮苷、新橙皮苷和柚皮苷的线性范围分别为0.5-200μg/mL、0.5-250μg/mL和0.5-200μg/mL，检测限分别为0.01μg/mL、0.03μg/mL和0.02μg/mL。陈皮降气颗粒中橙皮苷、新橙皮苷和柚皮苷的含量分别为12.46mg/g、6.25mg/g和4.23mg/g。本研究为陈皮降气颗粒的质量控制提供了可靠的依据。
关键词：HPLC法；陈皮降气颗粒；橙皮苷；新橙皮苷；柚皮苷
Abstract
Thefeasibilityofsimultaneousdeterminationofhesperidin,neohesperidin,andnaringininChenpiJianqigranulesbyHPLCwasinvestigated.Aprecise,rapid,andrepeatableHPLCmethodwasestablishedbyoptimizingsamplepreparationandchromatographicconditions.Thelinearrangeswere0.5-200μg/mL,0.5-250μg/mL,and0.5-200μg/mL,andthedetectionlimitswere0.01μg/mL,0.03μg/mL,and0.02μg/mLforhesperidin,neohesperidin,andnaringin,respectively.Thecontentsofhesperidin,neohesperidin,andnaringinintheChenpiJianqigranuleswere12.46mg/g,6.25mg/g,and4.23mg/g,respectively.ThisstudyprovidesareliablebasisforthequalitycontrolofChenpiJianqigranules.
Keywords:HPLC;ChenpiJianqigranules;hesperidin;neohesperidin;naringin
引言
陈皮降气颗粒是一种传统中药配方，主要用于脾胃气滞、消化不良、胸闷腹胀等症状的治疗。该配方选用柑橘属植物中药材陈皮和枳实，具有健脾开胃、疏肝理气、消食化滞、化痰止咳等功效。其中，陈皮中所含的黄酮类化合物橙皮苷、新橙皮苷和柚皮苷是其主要有效成分之一，对脾胃气滞和消化不良具有良好的疗效。
目前，萃取、TLC、HPLC等方法均可用于陈皮降气颗粒中黄酮类化合物的测定。其中，HPLC法因其分离度高、重复性好、检测限低、操作简便等特点，已成为黄酮类化合物分析和研究的主要手段之一。本研究旨在探讨HPLC法同时测定陈皮降气颗粒中橙皮苷、新橙皮苷和柚皮苷含量的可行性，并建立一种准确、快速、重复性好的分析方法，为该中药配方的质量控制提供科学依据。
实验
仪器和试剂
Agilent1200系列高效液相色谱仪，WatersC18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm），紫外检测器（UV）；
超声水浴清洗器，小凯科技搅拌器，天诚离心机，热水浴恒温器；
橙皮苷、新橙皮苷和柚皮苷标准品（纯度>98%）分别由国药集团玄中厚植物药材有限公司提供；
甲醇（HPLC级），去离子水（18.2MΩ）。
样品处理
取陈皮、枳实各100g，研磨成粉末，粉末加水300mL，煮沸后转小火煎煮30分钟，冷却后过滤，混合备用。
取陈皮降气颗粒粉末0.5g，加水10mL超声处理15分钟，离心10分钟，取上清液定容至10mL，过0.22μm滤膜，备用。
色谱条件
流动相：甲醇-0.2%草酸水溶液（15:85，体积比）
柱温：30℃
流速：1.0mL/min
检测波长：280nm
进样量：5μL
结果
标准曲线
取各标准品适量，按我们所说的方法前进行处理，测量其峰面积，得到如下结果（其中，x轴为浓度，y轴为峰面积）。
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样品测定
按照前文的样品处理进行处理，然后进行HPLC检测。经过峰面积计算后，计算出三种黄酮类化合物在样品中的含量。结果如下表所示。
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讨论
本研究建立了一种准确、快速、重复性好的HPLC法，实现了对陈皮降气颗粒中黄酮类化合物橙皮苷、新橙皮苷和柚皮苷的同时测定。通过优化样品制备和色谱条件等因素，确保了分离的准确性和重现性。在优化的色谱条件下，橙皮苷、新橙皮苷和柚皮苷的线性范围分别为0.5-200μg/m