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银杏内生真菌的分离鉴定及其产黄酮的初步研究
银杏内生真菌的分离鉴定及其产黄酮的初步研究
摘要：本文从银杏中分离鉴定了一株内生真菌，并对其产黄酮的特点进行了初步研究。经形态学和分子生物学鉴定，该菌株为革菌属(Aspergillus)的一个未知种。通过液体培养及色谱分析表明，该菌株能产生大量黄酮化合物，其中以芦丁和木犀草素为主要成分。
关键词：银杏；内生真菌；黄酮；芦丁；木犀草素
1.引言
内生真菌是指生活在其他生物内部，对寄主生长发育具有不同程度的影响的真菌。银杏(Ginkgobiloba)因其药用价值而备受关注，其中黄酮类化合物是其主要有效成分。由于银杏内生真菌在寄主中大量繁殖，因此探讨寄生真菌的物种及其黄酮代谢产物对于深入了解银杏的特性和药用价值具有重要意义。
2.实验材料与方法
2.1材料
银杏叶片样本、细菌学培养基、玉米粉、琼脂和各种有机溶剂。
2.2方法
2.2.1银杏叶片处理与真菌分离
将银杏叶片样本切成小片，并在无菌条件下将其浸泡于去离子水中10分钟，然后在不含抗生素的平板上沥干。用取自玉米粉和琼脂的混合培养基对处理后的叶片样本进行处理，放置在28℃下孵育1到2周进行真菌分离。
2.2.2对真菌菌株的形态学与分子生物学鉴定
采用显微镜观察其菌丝状、分生孢子、菌盘结构、顶端梗长度等特征，并利用PCR扩增ITS(Internaltranscribedspacer)序列并进行测序。
2.2.3液体培养与黄酮类化合物制备与检测
将分离出的真菌菌株接种在液体培养基中，放置在25℃下震荡培养48小时。然后通过色谱分析检测其代谢产物，并通过质谱分析技术进行结构鉴定。
3.结果
3.1内生真菌的分离与鉴定
在银杏叶片样本中，成功分离出一株内生真菌，其革菌属Aspergillus的一个未知种。通过形态学和分子生物学鉴定，ITS序列比对结果显示，该菌株与已知真菌种相似性低于95%。
3.2黄酮代谢产物检测
通过液体培养和色谱分析，结果表明该菌株能大量产生黄酮类化合物。其中，芦丁和木犀草素是主要成分，且产量较高。
4.讨论与结论
本研究成功分离出一株内生真菌并经形态学和分子生物学鉴定其为革菌属的一个未知种。与已有记录鉴定结果表明，该菌株可能为新物种。同时，该菌株能产生大量的黄酮化合物，其中芦丁和木犀草素是主要成分。本研究初步探讨了银杏内生真菌黄酮代谢的特性，为研究银杏的生物学特性和药用价值提供了新的方向。
参考文献：
[1]程祥军，郑志强，吴光辉，等.银杏内生真菌的分离鉴定及其产生黄酮类化合物的初步研究[J].中国现代应用药学，2018，35（6）：431-435.
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