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罗格列酮对野百合碱诱导肺动脉高压大鼠的作用及机制探讨
摘要：
目的：本文旨在探讨罗格列酮对野百合碱诱导肺动脉高压大鼠的作用及机制，并为寻求新的治疗肺动脉高压的途径提供一定的理论依据。
方法：将大鼠随机分为对照组、野百合碱组和野百合碱+罗格列酮组。采用HE染色法、Masson染色法及免疫组化法检测组织病理学和炎性因素的变化。Westernblotting法用于检测大鼠肺血管内皮生长因子（VEGF）和核转录因子κB（NFκB）的表达水平；ELISA法检测大鼠IL-8、IL-1β和TNF-α水平变化。
结果：与对照组相比，野百合碱组大鼠的肺组织炎症反应明显增强，血管内皮生长因子（VEGF）和核转录因子κB（NFκB）的表达水平升高，炎症因子（IL-8、IL-1β和TNF-α）的水平显著升高。而对野百合碱+罗格列酮组大鼠，肺组织结构相对稳定，VEGF和NFκB的表达水平均低于野百合碱组，炎症因子水平也明显下降。
结论：罗格列酮对野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠肺组织损伤和炎症反应具有明显的保护作用。罗格列酮通过抑制VEGF和NFκB表达和炎症因子水平达到其保护作用，为探寻新的治疗肺动脉高压的途径提供了一定的理论依据。
关键词：罗格列酮；野百合碱；肺动脉高压；VEGF；NFκB；炎症反应
正文：
一、前言
肺动脉高压（PAH）是一种少见但危及生命的疾病，病死率高。PAH的主要特征是肺动脉壁肌肉的增生和微血管的狭窄，导致肺动脉压力和肺血管阻力升高。PAH的发病机制至今尚未完全明确，但炎症反应和细胞增殖可能是PAH的主要路径。治疗PAH的主要方法是使用磷酸酯酶抑制剂和有效的血管扩张剂，然而，治疗效果有限且副作用也较大。
罗格列酮是一种抗炎药物，对于PAH的治疗也已经开始受到广泛关注。有研究证实，罗格列酮可以通过抑制核转录因子κB（NFκB）及其他炎症因子的表达，从而减轻PAH。
野百合碱是一种具有明显的毒性物质，研究显示其可以诱导PAH，用于大鼠和小鼠PAH模型的构建。因此，本研究将HE染色法、Masson染色法和免疫组化法等方法与Westernblotting法和ELISA法相结合，从分子水平和组织水平研究罗格列酮对野百合碱诱导肺动脉高压大鼠的作用和机制，为寻求一种治疗PAH的新途径提供一定的学术依据。
二、材料与方法
1.实验动物
本实验使用健康雄性SD大鼠，体重在200~250g之间，由南京医科大学动物实验中心提供。
2.实验药物
野百合碱和罗格列酮分别由国药集团江苏雪梨药业有限公司提供。
3.实验设计
实验将大鼠随机分为3组，每组10只，分别为对照组、野百合碱组和野百合碱+罗格列酮组。每个实验组的药物剂量为：野百合碱10mg/kg、罗格列酮5mg/kg。
4.组织采集和处理
在实验后的第28天，大鼠采集肺组织样本，并进行HE和Masson染色，免疫组化法检测iNOS、VEGF和NFκB的表达水平。Westernblotting法检测VEGF和NFκB的表达水平，ELISA法检测IL-8、IL-1β和TNF-α水平。
5.统计分析
用SPSS软件对实验结果进行统计学分析，并用图表方式表达。
三、结果
1.肺组织病理学检查
HE染色法显示，与对照组相比，野百合碱+罗格列酮组大鼠肺组织病理学改变显著减少，野百合碱组大鼠肺组织病理学改变显著增加，同时出现不同程度的肺泡间隔、毛细血管宽度、霉菌堆积等现象，提示野百合碱诱导了肺动脉高压。
2.Masson染色法
Masson染色法显示，与对照组相比，野百合碱+罗格列酮组大鼠肺组织的胶原纤维明显减少，野百合碱组的胶原纤维增多，提示处理的罗格列酮对野百合碱诱导的胶原生析具有一定的保护作用。
3.免疫组化法
免疫组化法显示，与对照组相比，野百合碱组大鼠的iNOS和VEGF的表达水平明显上调，而野百合碱+罗格列酮组的iNOS和VEGF的表达水平显著下降，说明罗格列酮对野百合碱诱导的PAH大鼠肺动脉内皮损伤具有一定的保护作用。
4.Westernblotting法
Westernblotting法显示，与对照组相比，野百合碱组大鼠的VEFG和NFκB的表达水平明显上调，而野百合碱+罗格列酮组的VEGF和NFκB的表达水平明显下降，因此罗格列酮可以通过抑制VEGF和NFκB的表达水平来减轻PAH的炎症反应。
5.ELISA法
ELISA法显示，与对照组相比，野百合碱组大鼠的IL-8、IL-1β和TNF-α的水平明显上调，而对于野百合碱+罗格列酮组大鼠，这些指标的水平相对低于野百合碱组，表明罗格列酮可以减轻炎症反应。
四、讨论
PAH是一种罕见但危及生命的疾病，其发病机制复杂、治疗效果有限，因此寻求新的治疗方式是很有必要的。在PAH的治疗中，罗格列酮作为一种抗炎药物是一个热门的研究方向。
本研究中，我们建立了野百