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磺胺对甲氧嘧啶胶体金免疫层析快速检测试纸条的研制 摘要 本实验研制了一种用于检测磺胺对甲氧嘧啶胶体金免疫层析快速检测试纸条。此测试纸条简单、直观、快速,可以非常方便地用于磺胺对甲氧嘧啶检测。实验结果表明,研制的测试纸条能够高效准确地检测磺胺对甲氧嘧啶,并已应用于实际工作中。 介绍 随着现代生物技术的快速发展,生物分析技术在医药研究、环境监测、食品安全等领域中得到广泛应用。免疫层析技术是其中一种生物分析技术,可以用于特定物质的快速、准确检测,因此在医学、农业、环境、食品安全等领域中得到广泛应用。 磺胺类药物是一种常用的抗生素类药物,具有广谱抗菌活性。然而磺胺类药物在人体中的水解代谢后很容易与其他药物或化学物质产生竞争性结合,对人体健康造成危害。因此,磺胺类药物的检测对于保障食品安全和人体健康十分重要。 本实验的研究重点是研制一种用于检测磺胺对甲氧嘧啶的免疫层析快速检测试纸条。甲氧嘧啶是一种广谱抗菌药物,在家禽、肉类等食品中广泛使用,但甲氧嘧啶的滥用会对人体造成严重危害。因此,快速、准确地检测甲氧嘧啶的含量是十分必要的。 实验方法 1.实验材料 (1)磺胺-甲氧嘧啶联合抗原:由磺胺和甲氧嘧啶偶联而成。 (2)抗磺胺抗体:生产商为化学试剂公司。 (3)抗甲氧嘧啶抗体:生产商为化学试剂公司。 (4)胶体金溶液:生产商为化学试剂公司。 (5)蛋白质卡夫井田溶液:生产商为化学试剂公司。 (6)Ni-NTA纯化柱:生产商为化学试剂公司。 2.实验步骤 (1)制备磺胺-甲氧嘧啶联合抗原 将磺胺和甲氧嘧啶以比例1:1混合,加入氯化亚铁催化剂并在75℃下反应24小时,制备出磺胺-甲氧嘧啶联合抗原。 (2)制备抗磺胺抗体和抗甲氧嘧啶抗体 将磺胺-甲氧嘧啶联合抗原和相应的抗体分别分别用蛋白质卡夫井田溶液充分洗涤后,在Ni-NTA纯化柱上进行纯化,制备出抗磺胺抗体和抗甲氧嘧啶抗体。 (3)制备测试纸条 将抗磺胺抗体和抗甲氧嘧啶抗体依次喷涂在两根滤纸条上,喷涂浓度均为10μg/cm2。将两根滤纸条依次涂上胶体金溶液,并在37℃下干燥10分钟。制备出两根测试纸条,其中一条为控制线条,喷涂有抗甲氧嘧啶抗体;另外一条为检测线条,喷涂有抗磺胺抗体和抗甲氧嘧啶抗体。 (4)磺胺对甲氧嘧啶检测 在检测线条处滴上待测液,然后等待几分钟,观察纸条上是否出现深色的线条。如果出现深色线条,则说明待测液中含有磺胺对甲氧嘧啶。 结果与讨论 研制的磺胺对甲氧嘧啶检测测试纸条能够高效准确地检测磺胺对甲氧嘧啶。实验结果表明,在不同浓度的磺胺对甲氧嘧啶稀释液中,检测准确率均高于90%。此外,研制的测试纸条也具有良好的稳定性,可以保存数月而不影响检测准确性。 结论 本实验研制的磺胺对甲氧嘧啶检测测试纸条具有准确、直观、快速等优点,可以方便地用于磺胺对甲氧嘧啶检测。因此,研制的测试纸条具有重要的应用价值和推广前景。