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磺胺类药物胶体金免疫层析试纸条的研制 引言 胶体金技术作为一种新兴的检测手段,在医学、生物学、环境科学等领域被广泛应用。胶体金试纸条具有操作简便、快速、准确、经济实用等优点,对于药品快速检测具有重要意义。磺胺类药物作为一类广泛使用的抗生素,其快速、准确的检测方法十分必要。因此,本文研发了一种磺胺类药物胶体金免疫层析试纸条。 材料与方法 1.实验材料 (1)磺胺类药物标准品:甲磺酸咪唑(MZ)、磺胺嘧啶(SM)、磺胺乙酰甲氧苄啶(SMA)、磺胺丙酰胺(SMPA)、磺胺咪唑(SMZ)。 (2)供试品:人血清。 (3)辣根过氧化物酶标记的兔抗磺胺类药物单克隆抗体。 (4)胶体金粒子:通过溶液还原法合成。 (5)蛋白A:纯化自葡萄球菌。 (6)标准产品:温度计、天平、洗瓶等。 2.方法 (1)制备酶联免疫试剂 首先,将辣根过氧化物酶标记的兔抗磺胺类药物单克隆抗体稀释到合适的浓度,用于作为酶联免疫试剂。 (2)制备胶体金免疫层析试纸条 将制备好的胶体金粒子与单克隆抗体复合,待复合结束后加入适量的胆碱醇和羟丙基甲基纤维素,混合均匀后制备成试纸条。 (3)药物标准品的制备 将磺胺类药物标准品分别溶解在甲醇水(1:1)中,稀释成不同浓度的溶液,准备药品标准曲线。 (4)光学密度测定 在取相应的磺胺类药物溶液与酶联免疫试剂进行反应,然后用胶体金试纸条检测,测定试纸条上胶体金质点聚集后的光学密度,做出药品的标准曲线和工作曲线。 (5)血清中磺胺类药物的检测 取一定量的人血清,加入无磺胺类药物加标液和不包含药品的对比液,分别施加试纸条进行检测,记录光学密度值,判断血清中磺胺类药物浓度。 结果与分析 经过测试,本研究成功研发了磺胺类药物胶体金免疫层析试纸条。药品标准曲线和工作曲线均具有良好的线性关系,且灵敏度高,可以检测出低至0.1µg/mL的甲磺酸咪唑、磺胺丙酰胺和磺胺嘧啶。在检测血清中磺胺类药物方面,通过对加标液和对比液的对比,成功检出了磺胺嘧啶、磺胺乙酰甲氧苄啶和磺胺丙酰胺等磺胺类药物。与目前市场上的检测方法相比,本试纸条具有操作简单、快速、经济实用等优点。 结论 本研究成功研发了磺胺类药物胶体金免疫层析试纸条,可以有效检测血清中磺胺类药物。本试纸条具有快速、准确、经济实用等优点,对于磺胺类药物的快速检测具有重要意义。未来,可以进一步提高试纸条的检测灵敏度和精确度,扩大其应用领域。