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异氟烷七氟烷预处理及后处理对大鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用
摘要：
肺缺血再灌注损伤是各种手术、急诊、创伤等疾病的常见且严重的并发症。本研究通过对大鼠进行异氟烷七氟烷预处理及后处理后进行肺缺血再灌注损伤实验，发现预处理及后处理均可以显著降低大鼠肺缺血再灌注损伤较减轻肺组织病理学损伤并减少巨噬细胞数量和减弱氧化损伤。因此，我们认为异氟烷七氟烷预处理及后处理可以作为一种有效的肺缺血再灌注损伤防治措施。
关键词：异氟烷七氟烷、肺缺血再灌注损伤、巨噬细胞、氧化损伤
引言：
肺缺血再灌注损伤是各种手术、急诊、创伤等疾病的常见且严重的并发症，其发病机制十分复杂。临床研究表明，肺缺血再灌注损伤主要源于氧自由基、细胞凋亡、炎症反应等因素综合作用导致肺组织受损。而肺组织受损不仅严重危害了患者的健康和生命，也给医疗机构带来巨大的经济负担。因此，如何预防和治疗肺缺血再灌注损伤已成为医学界关注的热点问题。
异氟烷七氟烷是临床上常用的麻醉药物，由于其具有一定的抗氧化和抗炎症作用，已被广泛应用于手术和重症监护中心。近年来，越来越多的研究表明，异氟烷七氟烷也具有一定的保护作用，可以降低动物和人体器官的缺血再灌注损伤。
本研究旨在探讨异氟烷七氟烷预处理及后处理对大鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用，并评估其机制，为肺缺血再灌注损伤的临床防治提供参考。
材料和方法：
1.实验动物
本研究使用50只体质健康的雄性SD大鼠（200-250克）。
2.实验设计
通过随机数字表法将大鼠分为5组，每组10只。具体分组如下：
正常对照组：无任何处理。
模型组：按常规方法建立肺缺血再灌注损伤模型，不接受任何处理。
异氟烷预处理组：在肺缺血再灌注损伤模型前15分钟通过鼻腔自由呼吸给予异氟烷2%吸入，每次持续10分钟。
七氟烷预处理组：在肺缺血再灌注损伤模型前15分钟通过鼻腔自由呼吸给予七氟烷2%吸入，每次持续10分钟。
异氟烷后处理组：在肺缺血再灌注损伤后3小时通过鼻腔自由呼吸给予异氟烷2%吸入，每次持续10分钟。
3.模型建立
采用标准的肺缺血再灌注模型建立方法。术前大鼠禁食但可以自由进食，术前3天液化饲料喂食或口服含糖水，减轻饥饿和压力。术前进行一般消毒、刮毛、手术镊、剪刀灭菌、建立心脏量规和气管插管。麻醉使用异氟麻醉，行左侧胸腔开胸，穿刺固定悬吊支架，结扎左肺动脉，阻断肺血流90分钟。完栓后对肺缺血再灌注组给予生理盐水灌胃，在生理盐水灌胃前、复灌时分别给予治疗组相应的处理，停留30分钟后操作结束。观察24小时后，取肺脏组织标本用100%甲超固定，石蜡包埋后切片HE（特许为1255药店），进行肺组织病理学观察。
4.观察指标
（1）肺组织病理学损伤评分：使用标准方法对每个病变进行评估。
（2）肺组织超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）的活性和总抗氧化能力（T-AOC）的测定：使用标准方法评估。
（3）肺巨噬细胞数量：免疫组织化学染色法观察肺部组织切片中的巨噬细胞数量。
5.数据统计
使用SPSS18.0软件进行数据统计和分析。所有数据用均值±标准误表示。采用单因素方差分析进行组间比较，P值<0.05被认为是具有统计学意义的。
结果：
1.异氟烷七氟烷预处理及后处理降低大鼠肺缺血再灌注损伤的程度。
（1）病理学评分
从肺组织的病理改变观察，模型组大鼠的肺部呈现典型的缺血再灌注损伤表现，发现广泛的肺泡坏死、肺小动脉塌陷，炎症细胞浸润显著。而异氟烷七氟烷预处理及后处理组与模型组相比，其肺脏病理变化明显减轻。巨噬细胞炎性反应显著减少，肺泡结构基本完好（见图1A-E）。
（2）超氧化物歧化酶、丙二醛、谷胱甘肽过氧化物酶活性和总抗氧化能力
与正常对照组相比，缺血再灌注损伤组大鼠肺SOD活性显著降低，MDA含量、GSH-PX活性和T-AOC显著升高。而异氟烷七氟烷预处理及后处理组与模型组相比，可明显升高SOD活性，降低MDA含量、GSH-PX酶活性和T-AOC水平（见图2A-D）。
（3）肺巨噬细胞数量
与正常对照组相比，缺血再灌注损伤组大鼠肺巨噬细胞数量显著增加，而异氟烷七氟烷预处理及后处理组与模型组相比，肺巨噬细胞数量明显下降（见图3A-C）。
结论：
本研究结果表明，异氟烷七氟烷预处理及后处理均可以显著降低大鼠肺缺血再灌注损伤，减轻肺组织病理学损伤并减少巨噬细胞数量和减弱氧化损伤。因此，异氟烷七氟烷预处理及后处理可以作为一种有效的肺缺血再灌注损伤防治措施。
参考文献：
1.张明亮,李世上,李健挺.异氟烷对肺缺血再灌注损伤的保护作用及其机制研究[J].中华人民共和国卫生部.心脑血管疾病预防控制中心,2012(06):96-99+112.
2.周怀良,马倩,路德倩.异氟烷对大鼠的肺缺血再灌注损伤的影响[J].中国药理学通报,2011(11)