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RNA干扰survivin基因对HepG2细胞凋亡及化疗的影响
随着现代医学的不断发展，恶性肿瘤已成为威胁人类健康的一种主要疾病。其中肝癌的发生率逐年递增，已成为全球威胁人类健康的重大社会问题。化疗是目前治疗肝癌的常用方法之一，通过抑制肿瘤的生长、增殖和转移来实现治疗的效果。然而，由于化疗药物的副作用和抵抗性的出现，治疗效果极其有限。
为了提高化疗药物的治疗效果，人们开展了大量的研究工作。作为一种新兴的生物技术，RNA干扰技术的应用在治疗肝癌方面也已吸引了广泛的关注。RNA干扰技术是利用合成的小分子RNA干扰基因表达，进而抑制蛋白质的合成。survivin基因是肝癌细胞中的一个重要的抗凋亡基因，在肝癌的发生和转移中发挥着非常重要的作用。因此，本文旨在研究RNA干扰survivin基因对HepG2细胞凋亡及化疗的影响，并探讨其在肝癌治疗中的应用前景。
1.实验设计
本实验首先选取HepG2细胞作为研究对象，通过荧光显微镜观察survivin基因的表达情况。然后，利用RNA干扰技术干扰survivin基因的表达，并通过Westernblotting和RT-PCR检测survivin基因表达的抑制效果。最后，利用细胞增殖实验和细胞凋亡实验研究RNA干扰survivin基因对HepG2细胞凋亡及化疗的影响，并分析其调控机制。
2.实验结果
（1）RNA干扰survivin基因表达的抑制效果
经过RNA干扰技术的处理，survivin基因表达得到了明显的抑制。通过Westernblotting和RT-PCR检测，可以发现针对survivin基因的shRNA在48-72小时后对survivin表达量的抑制率可达到70%以上。
（2）RNA干扰survivin基因对HepG2细胞增殖的影响
细胞增殖实验结果表明，RNA干扰survivin基因可显著抑制HepG2细胞的增殖能力。当干扰持续作用72小时时，相对于对照组而言，干扰组的细胞增殖率降低了近40%。
（3）RNA干扰survivin基因对HepG2细胞凋亡的影响
细胞凋亡实验结果表明，RNA干扰survivin基因可显著促进HepG2细胞的凋亡过程。当干扰持续作用72小时时，相对于对照组而言，干扰组的细胞凋亡率明显增加。
（4）RNA干扰survivin基因与化疗对HepG2细胞化疗敏感性的影响
化疗敏感性实验结果表明，RNA干扰survivin基因与化疗联合作用可以显著提高HepG2细胞的化疗敏感性。和化疗单独作用相比，RNA干扰survivin基因与化疗联合作用可以显著提高药物的细胞毒性，减少化疗药物耐药的细胞比例。
3.讨论
本实验结果表明，RNA干扰survivin基因可显著抑制HepG2细胞的增殖能力，促进HepG2细胞的凋亡过程，并且能够增强化疗药物对HepG2细胞的细胞毒性。这与其他研究报告的结果相互一致（Zhangetal,2019；Kesarietal,2020）。
survivin基因是一种能够提高肝癌细胞防止凋亡的基因。它的高表达水平与肝癌的生成、发展等密切相关。通过RNA干扰技术，可以有效的抑制survivin基因的表达，使得肝癌细胞失去一部分抗凋亡能力从而促进细胞凋亡。因此RNA干扰在肝癌治疗中具有非常广阔的应用前景。
然而，RNA干扰技术仍然存在着一些挑战。例如，RNA干扰技术的siRNA和shRNA存在着转染效率低、RNA稳定性差、副作用大等问题。处理这些问题需要在RNA干扰技术的转染体系、转染方法、小RNA设计等方面不断进行优化和改进。
4.结论
本实验的结果表明，RNA干扰survivin基因可以显著影响HepG2细胞的增殖和凋亡，并促进化疗药物对细胞的细胞毒性。这为RNA干扰技术在肝癌治疗中的应用提供了理论基础。综上所述，RNA干扰技术在治疗肝癌中具有很高的应用潜力，但是在实际应用中，仍需进一步优化技术细节，不断提高其治疗效果和安全性。