SiRNA转染肝癌HepG2细胞Survivin基因凋亡机制探讨的开题报告.docx

SiRNA转染肝癌HepG2细胞Survivin基因凋亡机制探讨的开题报告
开题报告标题：SiRNA转染肝癌HepG2细胞Survivin基因凋亡机制探讨
一、研究的背景和意义
肝癌是一种严重危害人类健康的恶性肿瘤，尤其在地区和国家之间存在着很大的差异。我国是肝癌的高发区之一，因此对肝癌的研究与治疗具有极其重要的意义。Survivin是一种高度保守的抗凋亡蛋白，在许多种恶性肿瘤中被高表达，其过度表达可以增加恶性肿瘤细胞的生存能力和繁殖能力，并且抵抗治疗，因此成为研究的热点。本研究选用HepG2细胞系，通过siRNA转染实现Survivin基因的靶向沉默，探究其对细胞凋亡的影响，研究Survivin的表达与肝癌生存率的相关性，对于研究肝癌的发生、发展、治疗和预后评估具有重要意义。
二、研究的方法
1.细胞培养及siRNA转染：选用人肝癌细胞系HepG2，采用siRNA转染技术来沉默Survivin基因的表达；
2.qRT-PCR检测Survivin基因表达水平：用qRT-PCR检测Survivin基因表达水平，分析siRNA转染对Survivin表达的影响；
3.Westernblot分析Survivin蛋白表达：用Westernblot方法分析Survivin蛋白的表达情况；
4.细胞凋亡检测：对转染的HepG2细胞检测细胞凋亡的程度，观察Survivin的沉默对细胞生长和凋亡的影响，探究Survivin基因是否参与了肝癌细胞的凋亡过程；
5.统计学分析：对实验数据进行统计学分析，分析Survivin的表达与肝癌生存率的相关性。
三、预期的研究结果
SiRNA转染可以有效抑制Survivin基因的表达，减弱HepG2细胞生长活性。通过Westernblot的检测，观察Survivin沉默对HepG2细胞中相关凋亡相关分子（如caspase-3、caspase-8）的影响。最后，通过细胞凋亡检测和实验统计学分析，探讨Survivin基因是否参与了肝癌细胞的凋亡过程，并分析Survivin的表达与肝癌生存率的相关性。期望通过本研究为肝癌的临床治疗提供新的治疗靶点。
四、研究的进展与计划时间表
本研究尚处于实验准备阶段，计划如下：
1.完成细胞的培养、siRNA转染及qRT-PCR实验（2周）；
2.Westernblot分析Survivin蛋白表达（2周）；
3.细胞凋亡检测及实验（4周）；
4.实验结果统计学分析（2周）；
5.论文撰写及答辩（4周）。
五、预期的研究贡献
本研究旨在探究Survivin基因对肝癌细胞凋亡的调控作用，研究Survivin的表达与肝癌生存率的相关性。结果可以为肝癌的治疗提供有益的启示和新的策略，为肝癌的发生、发展、治疗和预后评估提供重要的参考。本研究成果将具有一定的学术价值和应用价值。