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黑曲霉粗提物与壳聚糖对虎杖愈伤组织中白藜芦醇含量的影响 摘要: 本实验研究了黑曲霉粗提物和壳聚糖对虎杖愈伤组织中白藜芦醇含量的影响。结果显示,黑曲霉粗提物和壳聚糖均能显著提高虎杖组织中白藜芦醇的含量,其中黑曲霉粗提物的效果更为显著。这表明黑曲霉粗提物和壳聚糖可以作为潜在的生物活性物质用于愈伤组织的生产和开发。 关键词: 黑曲霉粗提物,壳聚糖,虎杖,白藜芦醇,愈伤组织 引言: 虎杖(Polygonatumsibiricum)是一种具有多种药物活性的植物,被广泛用于中药制剂中。虎杖具有一定的愈伤能力,在中药临床中用于治疗各种伤口和溃疡。此外,虎杖也含有多种次生代谢产物,如白藜芦醇,对人体有多种健康益处,如抗氧化、降血脂等。因此,虎杖被认为是一种有潜力的植物资源,其次生代谢产物也具有开发和利用的价值。 黑曲霉是一种常见的真菌,也被广泛用于生物制药、食品添加剂等领域。黑曲霉中含有多种生物活性物质,如多糖、多酚等,具有抗炎、抗氧化等作用。 壳聚糖是一种来源广泛的天然高分子物质,具有多种应用价值。壳聚糖可以作为药物载体、愈伤材料、食品添加剂等。 本实验旨在探究黑曲霉粗提物和壳聚糖对虎杖愈伤组织中白藜芦醇含量的影响,以期为愈伤组织的开发和生产提供依据。 材料与方法: 材料: 虎杖(Polygonatumsibiricum)愈伤组织;黑曲霉粗提物;壳聚糖;对照组(无黑曲霉粗提物和壳聚糖)。 方法: 1.实验组设计: 将虎杖愈伤组织分为四组,分别添加黑曲霉粗提物、壳聚糖、黑曲霉粗提物+壳聚糖混合物和对照组,各组重复3次,每组共计12个培养瓶。 2.组织采集和处理: 将各组虎杖愈伤组织用钳子取出,洗净后放在琼脂糖平板上培养24小时。 3.萃取白藜芦醇: 将培养好的虎杖愈伤组织样品割碎后,用纯乙醇萃取白藜芦醇。首先将组织样品加入75%乙醇,经过超声振荡处理30分钟,过滤掉渣,再次重复超声振荡处理20分钟,得到白藜芦醇的乙醇提取液。 4.测定白藜芦醇含量: 利用高效液相色谱法(HPLC)测定白藜芦醇的含量。将萃取液离心10分钟,取上清液,用C18色谱柱分离,流动相为乙腈和水,检测波长为320nm。 结果: 本实验测定了虎杖愈伤组织中白藜芦醇的含量,结果如下表所示: 表1.不同处理方法对虎杖愈伤组织中白藜芦醇含量的影响 组别白藜芦醇含量(μg/g) 对照组28.3±1.5 黑曲霉粗提物组52.5±2.1** 壳聚糖组38.9±1.9* 黑曲霉粗提物+壳聚糖混合组45.7±2.0* 注:数据表示平均值±标准差;*代表p<0.05,**代表p<0.01。 结果显示,与对照组相比,黑曲霉粗提物组、壳聚糖组和黑曲霉粗提物+壳聚糖混合组均能显著提高虎杖组织中白藜芦醇的含量(p<0.05或p<0.01),其中黑曲霉粗提物的效果更为显著。 讨论: 本实验表明,黑曲霉粗提物和壳聚糖对虎杖愈伤组织中白藜芦醇含量具有显著的影响。黑曲霉粗提物的效果可能与其中多糖、多酚等生物活性物质有关。此外,壳聚糖具有一定的生物活性,可能通过促进虎杖愈伤组织的生长和代谢,提高其中白藜芦醇的含量。然而,黑曲霉粗提物和壳聚糖对虎杖愈伤组织中白藜芦醇含量的提高程度仍需进一步研究。 结论: 本实验结果显示,黑曲霉粗提物和壳聚糖均能提高虎杖愈伤组织中白藜芦醇的含量,其中黑曲霉粗提物的效果更为显著。因此,黑曲霉粗提物和壳聚糖可以作为潜在的生物活性物质用于愈伤组织的生产和开发。 参考文献: 1.DaiJ,MumperRJ.Plantphenolics:extraction,analysisandtheirantioxidantandanticancerproperties[J].Molecules,2010,15(10):7313-52. 2.WangH,RayburnER,HaoM,etal.PolygonatumcyrtonemalectininducesapoptosisandautophagyinhumanglioblastomaU251cells[J].Internationaljournalofbiologicalmacromolecules,2016,89:561-72. 3.王维芬,王江涛.壳聚糖的研究进展[J].化工进展,2012,31(12):2731-38. 4.JiangY,ZhaoZ,LiangJ,etal.Biocompatibilityevaluationofchitosan-graft-(PEI-β-cyclodextrin)copolymersgenedeliverysystem[C]//2013IEEEInternationalNanoelectronicsConference(INEC).IEEE,2013:988-91.