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紫外线对虎杖愈伤组织中白藜芦醇合成诱导的研究的任务书 任务书 课题名称:紫外线对虎杖愈伤组织中白藜芦醇合成诱导的研究 任务要求:本研究的主要目的是探究紫外线对虎杖愈伤组织中白藜芦醇合成的诱导作用及其可能的机制。研究方法包括植物组织培养、生化分析、基因表达分析等。具体要求如下: 1.文献调研:对虎杖白藜芦醇的生物合成过程及其影响因素进行文献调研,掌握已有的关于紫外线诱导虎杖白藜芦醇合成的研究进展和成果。 2.筛选材料:选择具有较强愈伤能力的虎杖组织为材料,筛选合适的诱导实验条件,包括紫外线波长、光照强度、辐射时间、温度、湿度等。 3.愈伤组织培养:采用体外愈伤技术,将虎杖愈伤组织培养在含有适宜营养成分的MS培养基上,调整培养条件,将愈伤组织培养到适宜的生长与增殖阶段。 4.紫外线辐照:根据预实验结果确定最佳的紫外线辐射条件,对虎杖愈伤组织进行辐照处理。 5.生化分析:在紫外线辐照前后采集愈伤组织,检测其白藜芦醇含量以及相关酶活性。 6.基因表达分析:利用qRT-PCR技术分析虎杖愈伤组织中白藜芦醇生物合成相关基因的表达情况,从分子水平探究紫外线对白藜芦醇合成的影响机制。 7.数据分析:对实验所得数据进行统计分析和图表处理,从中得出结论。 任务进度安排: 第一周:文献调研,掌握虎杖白藜芦醇的生物合成机制,了解已有的关于紫外线诱导虎杖白藜芦醇合成的研究进展。 第二周:选择愈伤组织,调整组织培养条件,保证其生长与增殖。 第三周:预实验,确定最佳的紫外线辐照条件,为正式实验做好准备。 第四周-第六周:正式实验,对虎杖愈伤组织进行紫外线辐照处理,采集实验材料,进行生化分析和基因表达分析。 第七周-第八周:数据分析,对实验所得数据进行统计分析和图表处理,从中得出结论。 第九周:完成研究报告的撰写,形成合格的学术论文。 重点难点及解决措施: 重点:虎杖愈伤组织中白藜芦醇合成诱导的分子机制。 难点:确定合适的紫外线波长和辐射时间,掌握体外愈伤技术。 解决措施:对文献进行详细的调研,做好预实验,依据结果确定最佳的实验方案。对愈伤组织培养技术进行充分的学习和练习,保证实验效果的可靠性。 参考文献: 1.Wang,Y.,Liao,H.,Huang,R.,etal.(2016).Developmentandvalidationofamethodforsimultaneousquantificationofstilbenoidsbyultra-high-performanceliquidchromatographyquadrupole/time-of-flightmassspectrometryinthetuberofsixmedicinalplantsofDioscoreaspp.JournalofChromatographyB-AnalyticalTechnologiesintheBiomedicalandLifeSciences,1014,72-81. 2.Kiselev,K.V.,Dubrovina,A.S.,Shumakova,O.A.,&Manyakhin,A.Y.(2017).ThegenesforflavonoidsynthaseIIandIIIfromtheSiberianLarchconferflavonoid-specificenzymeactivity.PlantPhysiologyandBiochemistry,111,62-68. 3.Dubrovina,A.S.,Kiselev,K.V.,&Zhuravlev,Y.N.(2013).Tissue-specificandlight-regulatedexpressionoftheSTSgene,responsibleforbiosynthesisofpterostilbeneingrapevine.PlantScience,208,1-10.