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羟基喜树碱包合物脂质体的制备及体外抗肿瘤作用研究
摘要：
本研究旨在制备羟基喜树碱包合物脂质体，并研究其体外抗肿瘤作用。首先，采用薄膜超声法制备羟基喜树碱包合物脂质体，得到的结果表明采用这种方法可以成功制备出稳定的脂质体。然后进行药物释放和细胞毒性实验，得出羟基喜树碱包合物脂质体对MCF-7和A549细胞的抑制效果显著。最后，进行细胞凋亡和损伤实验，通过传统的细胞荧光分析法检测到脂质体对细胞凋亡额外有贡献。因此，本研究的初步结果表明，羟基喜树碱包合物脂质体在体外具有潜在的抗肿瘤作用，是一种值得进一步探究的治疗肿瘤的药物候选。
关键词：羟基喜树碱；包合物；脂质体；体外抗肿瘤作用
引言：
随着人们对肿瘤的认识不断提高，治疗肿瘤的药物也不断更新换代。在众多天然药物中，羟基喜树碱作为一种有效的抗肿瘤成分，已被证明具有良好的药理学特性。但可惜的是，由于其自身的化学特性和药剂学特性等，羟基喜树碱的疗效受到了很大的限制。因此，如何通过新的制剂技术，提高喜树碱的稳定性、生物利用度和治疗效果等成为了热门的研究方向。在这方面，脂质体因其安全性和针对性等特点而受到了广泛的研究和应用。本研究旨在通过制备羟基喜树碱包合物脂质体，并研究其体外抗肿瘤作用，为治疗肿瘤提供新的治疗策略。
材料与方法：
材料：
1.羟基喜树碱（Harringtonin，HAR）;
2.卵磷脂（磷酸二酰胆碱，DPPC）;
3.癸基胆固醇（chol）;
4.碘代苯丙酮（IPTG）；
5.MTT；
6.舒芬太尼；
7.人前列腺细胞癌细胞（DU145）。
方法：
制备羟基喜树碱包合物脂质体
1.称取0.02g羟基喜树碱、5.8mg卵磷脂和1.45mg癸基胆固醇；
2.将所称取的3种药剂均匀混合，加入2mL甲醇中；
3.将混合物转移至圆底烧瓶中，利用蒸发膜法超声分散法，将甲醇蒸发至干燥；
4.将圆底瓶中残留的白色固体加入0.9%生理盐水，并用转盖超声波处理器处理8min以得到羟基喜树碱包合物脂质体溶液。
药物释放实验
1.将制备好的脂质体10mg/mL与PBS溶液按比例配制，在37°C下恒温振荡60分钟；
2.在不同时间点上取样分离离心10min，且分析羟基喜树碱的释放。
细胞毒性实验
1.将制备好的脂质体（用DMEM稀释，羟基喜树碱位于原来的浓度中）以及单独的羟基喜树碱加入至MCF-7和A549细胞中；
2.细胞放置12小时后，用MPT检测细胞活力。
细胞凋亡和损伤实验
1.将制备好的脂质体（同时含有羟基喜树碱）加入到DU145细胞中；
2.细胞放置12小时后，用传统的细胞荧光分析法检测细胞凋亡的情况。
结果与讨论：
制备羟基喜树碱包合物脂质体：
实验表明，采用超声波薄膜制备羟基喜树碱包合物脂质体的方法可以成功制备出稳定的脂质体。后续的实验结果表明，制备好的脂质体可以用于药物释放和细胞毒性实验。
药物释放实验：
药物释放实验结果表明，制备好的羟基喜树碱包合物脂质体可以缓慢释放出药物，并且不会导致药物在很短的时间内释放完全。
细胞毒性实验：
羟基喜树碱包合物脂质体对MCF-7和A549细胞的抑制效果显著，而且抑制的效果是dose-dependent的。实验结果表明，制备好的脂质体对于这两种细胞具有很好的毒性。
细胞凋亡和损伤实验：
通过传统的细胞荧光分析法检测到羟基喜树碱包合物脂质体对细胞凋亡额外有贡献，这表明脂质体对细胞凋亡可能有增强作用。
结论：
本研究初步验证了羟基喜树碱包合物脂质体具有良好的药物释放能力和体外抗肿瘤作用。虽然本研究还有待进一步优化和完善，但可以肯定的是，羟基喜树碱包合物脂质体在治疗肿瘤方面具有广阔的发展前景。