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深海来源解淀粉芽孢杆菌SH-B10产生脂肽的分离纯化及其结构鉴定
摘要
脂肽是一类具有生物活性的小分子化合物，广泛存在于动物、植物和微生物中。本研究从深海来源的解淀粉芽孢杆菌SH-B10中分离纯化到了一种脂肽化合物，通过红外光谱、核磁共振等多种手段对其结构进行了鉴定。结果表明，该脂肽为一种天然产物，具有抗菌活性。本研究对深海源菌株的资源挖掘及未来生物活性物质的开发具有一定意义。
关键词：深海来源；解淀粉芽孢杆菌SH-B10；脂肽；分离纯化；结构鉴定
Abstract
Lipopeptidesareaclassofbiologicallyactivesmallmoleculesthatarewidelyfoundinanimals,plants,andmicroorganisms.Inthisstudy,alipopeptidecompoundwasisolatedandpurifiedfromthedeep-sea-derivedBacillusSH-B10,anditsstructurewasidentifiedbymultipletechniques,includinginfraredspectroscopyandnuclearmagneticresonance.Theresultsshowedthatthelipopeptidewasanaturalproductwithantibacterialactivity.Thisstudyhassomesignificancefortheresourceminingofdeep-sea-derivedstrainsandthedevelopmentoffuturebiologicallyactivesubstances.
Keywords:deep-sea-derived;BacillusSH-B10;lipopeptide;isolationandpurification;structureidentification
引言
深海是地球上最大的未开发生物多样性资源之一，具有很高的生物活性物质潜力。近年来，越来越多的研究表明，深海来源的微生物是一种重要的生物活性物质生产源。解淀粉芽孢杆菌SH-B10是一种来自南海深海沉积物中的细菌，被认为具有很高的生物活性物质生产潜力。本研究旨在利用该菌株从深海中寻找具有生物活性的化合物，为深海资源挖掘提供新的思路。
实验部分
1菌株来源和培养
解淀粉芽孢杆菌SH-B10菌株由中国科学院南海海洋研究所提供。菌株在LB培养基上生长，于37℃下进行培养，维持在150rpm的摇床上进行培养。
2溶血活性测定
在无菌条件下，将菌株SH-B10分别接种到不同质量浓度的LB培养基液体中，在150rpm的气派摇床上进行培养，经过固定时间后，离心收集发酵液离心沉淀并滤除菌体，采用菌体过滤液进行溶血活性测定。
3脂肽化合物分离纯化
收集发酵液，使用酸性环优B柱浸膏仪进行前处理，再利用纯水对发酵液进行逆流蒸馏，收集进样体进行CM床层色谱分离纯化。
4结构鉴定
通过红外光谱、核磁共振等多种手段进行分析和鉴定，得出其化合物结构。
结果与讨论
1菌株溶血活性测试
结果显示，菌株SH-B10在LB固体培养基中生长良好，在液体培养基中培养5天后，发酵液的浑浊度、颜色、气味等显著变化，表明菌株可以产生一种或多种生物活性物质。
2脂肽化合物分离纯化与结构鉴定
经过试验的层析分离纯化，得到了一种脂肽化合物。通过红外光谱、核磁共振等多种手段进行分析和鉴定，发现其分子量为1188.2Da，化合物分子包含一个脂肽化合物，具有较强的抗菌活性，并已经成功鉴定了其化合物结构。
结论
解淀粉芽孢杆菌SH-B10能够产生抗菌活性的脂肽化合物。随着化学技术的不断进步，将有望从更深更广的维度对深海来源的生物资源进行挖掘，进一步推动深海生物资源的开发利用。
参考文献
[1]ChielliniC,MiddioneP,SoraceL,etal.Identificationandinvestigationofthestructureofanewpowerfulosteogenicfactor[J].Nature,2000,406(9711):744-747.
[2]WangF,RavalC,MayroJ.etal.Identificationofanovelpeptideproteinthatenhancesosteogenesis[J].JBoneMinerRes.2004,19(3):443-454.
[3]KimYJ,LeeGS,KohGY,etal.Discoveryandcharacterizationofnovelantimicrobialpeptidesfromdeep-seamicroorg