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全反式维甲酸对Aβ42诱导星形胶质细胞凋亡的抑制作用及其机制研究的任务书
任务书
一、任务背景
阿尔茨海默病(AD)是老年痴呆的一种常见疾病，具有进行性损害记忆等认知功能的表现。病理上，阿尔茨海默病患者在大脑中沉积了淀粉样β-蛋白(Aβ)，形成了斑块和缠结。针对阿尔茨海默病的药物研究常以抑制Aβ的沉积和降解为主要研究方向。全反式维甲酸(ATRA)是一种维生素A酸衍生物，具有多种生物活性。已经证实，ATRA可抑制Aβ42在神经元和小胶质细胞中的积聚，导致细胞凋亡和神经炎症。
ATRA作为一种强抗氧化剂和自由基清除剂，其化学性质的变化与许多代谢程序，包括细胞生长调控、细胞分化和细胞凋亡等紧密相关。然而，关于ATRA对星形胶质细胞（mainlyconsistingofastrocytesandoligodendrocytes）的作用机制研究还相对缺乏。
二、任务目的
本次任务旨在探索ATRA对Aβ42诱导的星形胶质细胞凋亡的抑制作用及其相关机制的研究。
三、任务内容
1.准备工作
(1)精心制作试验所需得生化试剂和细胞培养基。
(2)购买实验所需的化学物品和相关设备。
(3)评价实验方法和监测技术。
2.提取星形胶质细胞
(1)从大鼠脑组织中分离出星形胶质细胞。
(2)通过酶消化分离得筛选后的星形胶质细胞。
3.培养细胞，建立细胞模型
将提取得的星形胶质细胞分别培养至自身分化程度的60%-70%、80%-90%和100%，得到自身发育程度不同的三种模型。使用3-甲基氨基丙酸（MAP）诱导Aβ42表达，制备Aβ42诱导细胞模型。
4.细胞毒性实验
(1)采用MTT实验对ATRA的细胞毒性进行评估。
(2)通过AnnexinV-FITC/PI双染技术评估ATRA对Aβ42诱导星形胶质细胞凋亡的抑制作用。
5.分析ATRA对Aβ42诱导星形胶质细胞凋亡的机制
(1)利用气象球蛋白A诱导离子通道活性检测ATRA对星形胶质细胞钙离子水平的影响。
(2)实验通过Westernblotting检测ATRA对Aβ42合成过程中每个环节的影响。
(3)通过检测NF-κB、PI3K/Akt、MAPK等信号通路的磷酸化水平，评估ATRA对调节Aβ42诱导星形胶质细胞凋亡的作用。
6.综合分析ATRA对Aβ42诱导星形胶质细胞凋亡的影响
(1)通过PCR和荧光定量PCR评估ATRA对星形胶质细胞上调、下调的基因表达的影响。
(2)分析ATRA对细胞凋亡相关因子表达的影响。
(3)评估ATRA调控细胞增殖的作用，特别是它对不同模型、不同IC50的情况下的影响。
四、完成标准
1.完成任务书所列实验任务，实验设计合理、操作规范，实验数据符合科研要求。
2.撰写结论和摘要。对ATRA对Aβ42诱导星形胶质细胞凋亡的抑制作用及其机制进行综合分析，并从实验结果中得出科学合理的结论。明确实验目的、研究方法、实验结果、结论等，总结文章的重要性和意义。
3.撰写论文。根据实验结果撰写论文，论文应包括绪论、实验方法、实验结果、讨论和结论等部分，符合相关学术规范和硕士论文规定。