7500荧光定量PCR仪使用说明.doc

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7500荧光定量PCR仪使用说明
注意事项：
实验过程必须戴干净的一次性乳胶手套进行操作。
PCR反应所用的96孔板、8联管或单管必须为ABI7500专用,凸盖PCR管禁止使用。
使用8联管两侧需用空管支撑,使用单管四角需用空管支撑，以防止板槽受力不均。
实验数据用光盘刻录，禁止U盘拷取，数据可暂存于本机电脑硬盘中，各实验室D盘中有指定文件夹,中心外部人员数据存于FUWU文件夹下的子文件夹中。
操作步骤
开机
依次打开电脑显示屏、主机，输入开机密码“7500”.
当仪器只显示Power状态指示灯时，方可按压托盘以打开它。
待电脑启动稳定后，按压7500仪器电源按扭，等待仪器启动（约30s）。

放入反应板
按压此处

注：关闭仪器托盘时,应按一个角度推压托盘的右侧。
（以下过程按字母顺序a→q进行操作）
创建反应板文件
双击电脑桌面上SDS软件图标打开SDS软件；
在对话框中选择CreateNewDocument…，或选择菜单栏File〉New；
单击Next
为反应板文件命名
从Assay下拉列表中选择反应板类型
反应板文件类型有以下几种：
RelativeQuantification(ddCt)Plate（相对定量）
AbsoluteQuantification(StandardCurve)（绝对定量，标准曲线）
AllelicDiscrimination（等位基因鉴别）
Plus/Minus（阳性/阴性实验）

单击Next
选择要添加到反应板文件的探针（引物），单击Add添加选中探针
如果在列表中未列出所需探针，请单击NewDetector创建新探针

为每个反应孔指定探针和任务
选取探针相同的反应孔
点击反应孔对应的探针。
单击Task栏的下边指定探针任务。
选择Use（使用）。
单击Finish（完成）。
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k
g
i
h

为反应孔设置样品名
选取反应孔，直接输入相应样品名（也可右键，调出反WellInspector对话框，在SampleName中进行修改）

设定PCR循环参数、运行程序
选择Instrument选项卡，默认条件下显示标准PCR条件，可跟据实验具体情况修改；
单击AddDissociationStage添加溶解曲线循环；
修改PCR反应体积；
将反应板文件保存至指定路径。
点击Start运行程序
q
m
o
p
n

结束实验
实验结束后关闭软件.（确认反应板文件数据已保存）
打开拖盘，将反应板取出，关闭拖盘。
按下7500仪器电源开关关闭机器。
关闭电脑及显示屏。
请严格按照仪器使用说明进行操作，如有不明之处或遇其他情况请及时联系仪器负责
人.
谢谢配合！！
登记仪器使用情况.