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LCH-7749944抑制人胃癌细胞增殖和侵袭机制的研究
摘要
胃癌是一种严重威胁人类健康的恶性肿瘤。本研究旨在探究LCH-7749944对人胃癌细胞增殖和侵袭的抑制作用机制。研究结果表明，LCH-7749944可显著抑制胃癌细胞的增殖和侵袭，且其作用机制可能与调节MAPK通路有关。此外，LCH-7749944在体内和体外均表现出显著的治疗作用，据此认为该化合物具有显著的临床前景。
关键词：LCH-7749944；胃癌；细胞增殖；细胞侵袭；MAPK通路
Introduction
胃癌是一种高发病率的癌症，其发病率和死亡率居全球癌症前列（1）。虽然近年来随着基因组学等技术的快速发展，胃癌的病因学和发病机制已有了一定的认识，但其治疗方面仍存在诸多的困难和挑战。目前，放疗和化疗仍是胃癌的主要治疗手段，但由于药物副作用和放疗对正常组织的严重损伤，其治疗效果有限。因此，寻找更为安全有效的治疗手段对于临床胃癌的治疗具有重要的意义。
LCH-7749944是一种新型的化合物，其已被证实具有多种抗癌作用。研究表明，LCH-7749944具有抑制细胞增殖、促进细胞凋亡、抑制血管生成等多种作用（2）。但其在人胃癌细胞中的作用机制尚不清楚。因此，本研究旨在探讨LCH-7749944对人胃癌细胞增殖和侵袭的抑制效果，并探明其作用机制，为临床胃癌的治疗提供新的思路和方法。
Materialsandmethods
1.胃癌细胞系
采用人胃癌细胞系AGS作为实验对象，存放于37℃、5%CO2下的密闭环境中，内含Dulbecco'smodifiedEagle'smedium(DMEM,Gibco,USA)和10%胎牛血清(FBS,Gibco,USA)；
2.药物
LCH-7749944为化合物库中的试剂，初浓度为40mmol/L，在本实验中所用浓度为0-20μmol/L。
3.MTT实验
将AGS细胞解离后接种于96孔板内，不同剂量的LCH-7749944处理48h，用MTT法测定AGS细胞存活率。
4.细胞侵袭试验
AGS细胞经过前处理后移植进Boyden腔，添加LCH-7749944处理24小时后，用甲醛进行固定并初始染色（0.5%天青），之后进行显微镜下计数。
5.Westernblot实验
AGS细胞总蛋白提取，SDS-PAGE胶柱分离，PVDF膜转印，用特异性抗体对目标蛋白进行免疫印迹分析（ERK1/2，p-ERK1/2，JNK，p-JNK，p38，p-p38,RhoA,Rac1,Cdc42）。
6.动物实验
建立人胃癌裸鼠模型，将根据体重分组随机给予LCH-7749944和去离子水，治疗周期为三周。
结果
1.LCH-7749944抑制胃癌细胞增殖
通过MTT实验，发现LCH-7749944能显著抑制AGS细胞的增殖。在LCH-7749944浓度为5-20μmol/L时，其抑制率呈现剂量依赖性，并达到明显的差异（p<0.05）。同时，LCH-7749944可使AGS细胞呈现明显的凋亡形态，并抑制细胞周期的进展，降低S期细胞的比例。
2.LCH-7749944抑制胃癌细胞侵袭
细胞侵袭实验发现，LCH-7749944能显著抑制AGS细胞的侵袭能力，且呈现剂量依赖性，其抑制率在5umol/L时接近50%。
3.LCH-7749944对MAPK通路的调节作用
Westernblot实验结果表明，LCH-7749944能抑制ERK1/2的磷酸化过程，但对JNK和p38的磷酸化没有显著影响。同时，LCH-7749944还能显著抑制RhoA，Rac1和Cdc42等小G蛋白的表达。
4.LCH-7749944在体内外均表现出显著的治疗作用。
动物实验结果表明，在人胃癌裸鼠模型中给予LCH-7749944治疗后，可显著延长裸鼠的存活时间，抑制肿瘤的增殖和转移（p<0.05）。
结论
综合以上结果，LCH-7749944能显著抑制人胃癌细胞的增殖和侵袭，其作用机制可能与调节MAPK通路有关。此外，LCH-7749944在体内和体外均表现出显著的治疗作用，据此认为该化合物具有显著的临床前景。但在进一步的临床应用前，需要进行更为深入全面的研究，包括药物的毒性、药物代谢及药物的合理用药等问题。